Trong khi nhiệt động học lý thuyết về tương tác kháng nguyên-kháng thể đã được biết đến, việc sử dụng thực tế của chúng trong việc phát hiện hoặc xác định các kháng thể tự động là khan hiếm. Đối với các kháng thể chức năng, việc xác định ái lực tối ưu cho phép đạt được lợi ích trị liệu tối đa. Ái lực kháng thể đã được nghiên cứu trong gần nửa thế kỷ và kể từ khi bắt đầu sử dụng sắc ký ái lực ba thập kỷ trước, nó đã phát triển thành một công cụ mạnh mẽ. Ái lực mô tả sự tương tác trong một trang web ràng buộc cá nhân. Kiến thức về ái lực cũng như cấu trúc và tính chất kháng nguyên là rất cần thiết để đánh giá mối liên hệ giữa ái lực và tiềm năng đối với một kháng thể chức năng. Tuy nhiên, ngoài mối quan hệ, còn có một khái niệm ràng buộc khác gọi là ái lực, đó là sức mạnh liên kết tổng thể của sự tương tác giữa một kháng nguyên đa hóa trị và một kháng thể đa hóa trị. Mặc dù có sự khác biệt rõ ràng giữa hai loại, các thuật ngữ ái lực và ái ân thường được sử dụng một cách bừa bãi. Chúng ta hãy xem hai.
Ái lực là lực liên kết của một paratope của một phân tử kháng thể với epitope tương ứng của nó trên phân tử kháng nguyên. Nó mô tả sự tương tác trong một trang web ràng buộc cá nhân. Kiến thức về ái lực cũng như cấu trúc và tính chất kháng nguyên là rất cần thiết để đánh giá mối liên hệ giữa ái lực và tiềm năng đối với một kháng thể chức năng. Nó dựa trên các nguyên tắc nhiệt động lực học tương tự chi phối bất kỳ tương tác sinh học có thể đảo ngược nào, sức mạnh liên kết tương tự cho phép hệ thống miễn dịch của bạn chống lại nhiễm trùng. Và sức mạnh liên quan đến sức mạnh của một liên kết cụ thể giữa một kháng thể và kháng nguyên của nó. Đánh giá chính xác và chính xác về ái lực đối với tương tác kháng nguyên-kháng thể là một phép đo quan trọng để thiết lập giới hạn ái lực và trần tiềm năng cho một kháng thể trị liệu. Theo thuật ngữ nhiệt động lực học, ái lực được biểu thị bằng tổng của tất cả các lực hấp dẫn dẫn đến tăng cường lực liên kết và lực đẩy dẫn đến giảm cường độ liên kết.
Tính linh hoạt là một khái niệm ràng buộc khác thường bị nhầm lẫn với ái lực; trong thực tế, cả hai thuật ngữ đều đề cập đến khái niệm cường độ liên kết, ngoại trừ ái lực đề cập đến tổng cường độ của khả năng liên kết kháng nguyên của hỗn hợp các kháng thể đa dòng. Tính khả thi xuất hiện khi một kháng nguyên đa hóa trị liên kết với một kháng thể hai phần trong dung dịch hoặc khi một kháng thể liên kết với hai phân tử kháng nguyên đơn trị trên bề mặt. Không giống như ái lực, ái lực mô tả sự liên kết đa trị giữa nhiều vị trí liên kết của phối tử và liên kết tương ứng. Nói một cách đơn giản, ái lực là lực liên kết giữa kháng thể đa trị và kháng nguyên đa trị. Tính ái lực không thể được mô tả bằng các thuật ngữ nhiệt động lực học, và thu được bằng các phép đo động học. Tính khả thi của kháng thể phụ thuộc vào ái lực của các vị trí gắn kháng thể riêng lẻ, nhưng lớn hơn ái lực liên kết vì tất cả các tương tác kháng thể-kháng nguyên phải bị phá vỡ đồng thời để kháng thể phân tách hoàn toàn.
Các thuật ngữ ái lực và ái ân đôi khi được sử dụng không thích hợp làm từ đồng nghĩa. Trong thực tế, cả hai thuật ngữ đều đề cập đến khái niệm sức mạnh ràng buộc. Ái lực được định nghĩa theo thuật ngữ nhiệt động là phép đo mức độ liên kết giữa kháng thể và kháng nguyên, trong khi sức mạnh tổng thể liên kết một kháng thể đa trị với kháng nguyên đa hóa trị được gọi là ái lực hay còn gọi là ái lực chức năng. Ái lực là sức mạnh liên kết của một vị trí kết hợp kháng thể với một epitope kháng nguyên tương ứng, trong khi đó ái lực là tổng sức mạnh của khả năng liên kết kháng nguyên của hỗn hợp các kháng thể đa dòng. Tính linh hoạt cũng được gọi là ái lực chức năng.
Thuật ngữ ái lực biểu thị hằng số liên kết nội tại giữa kháng thể và phối tử không liên kết như hapten, trong khi thuật ngữ ái lực được sử dụng để biểu thị năng lượng liên kết tổng thể giữa kháng thể và kháng nguyên đa trị. Hằng số kết hợp là thước đo ái lực của kháng thể đối với văn bia. Tính ái lực không thể được mô tả bằng các thuật ngữ nhiệt động lực học, và thu được bằng các phép đo động học. Theo thuật ngữ nhiệt động lực học, ái lực được biểu thị bằng tổng năng lượng của lực hấp dẫn và lực đẩy liên phân tử phạm vi gần giữa yếu tố quyết định kháng nguyên và vị trí liên kết của nó.
Ái lực kháng thể có thể đóng một vai trò quan trọng trong việc xác định các hoạt động sinh học của kháng thể. Vì vậy, cần phải có khả năng mô tả phản ứng kháng thể về mặt ái lực cũng như cường độ và cũng để hiểu làm thế nào mối quan hệ kháng thể có thể ảnh hưởng đến một xét nghiệm cụ thể. Thuật ngữ ái ân đôi khi được sử dụng đồng nghĩa với ái lực nhưng thông thường nhất nó được sử dụng để mô tả khả năng của kháng thể hình thành các phức hợp ổn định với kháng nguyên. Tính linh hoạt là sức mạnh tích lũy của nhiều ái lực của các vị trí gắn kháng thể riêng lẻ.
Mặc dù sự khác biệt của chúng, các thuật ngữ ái lực và ái ân thường được sử dụng một cách bừa bãi. Ái lực là lực liên kết của một paratope của một phân tử kháng thể với epitope tương ứng của nó trên phân tử kháng nguyên và chỉ có thể được xác định bởi một đoạn Fab đơn trị. Đó là tổng hợp của tất cả các lực hấp dẫn dẫn đến tăng cường lực liên kết và lực đẩy dẫn đến giảm sức mạnh liên kết. Mặt khác, tính linh hoạt là lực liên kết giữa kháng thể đa hóa và kháng nguyên đa trị, và còn được gọi là ái lực chức năng. Năng lượng liên kết đo được giữa các kháng thể và các kháng nguyên tương ứng của chúng phản ánh tính linh hoạt của kháng thể. Không giống như ái lực, ái lực không thể được mô tả bằng các thuật ngữ nhiệt động và được lấy bằng các phép đo động học.