Các sự khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh là ELISA cạnh tranh sử dụng kháng nguyên ức chế trong khi ELISA không cạnh tranh không sử dụng kháng nguyên ức chế cho xét nghiệm.
Xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme (ELISA) là một xét nghiệm miễn dịch phát hiện các mục tiêu khác nhau như kháng thể, kháng nguyên, protein và glycoprotein. Đó là một phương pháp nhanh chóng và đơn giản để thực hiện. Do đó, nó thường được sử dụng cho mục đích nghiên cứu và chẩn đoán. ELISA liên quan đến việc sử dụng các enzyme và sự gắn kết cụ thể của kháng thể và kháng nguyên. Dựa trên cách các phản ứng xảy ra, có bốn loại ELISA: ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp, ELISA sandwich và ELISA ức chế. ELISA trực tiếp, gián tiếp và sandwich là các loại ELISA không cạnh tranh trong khi ELISA ức chế là một loại ELISA hoàn chỉnh. Mục đích chính của bài viết này là thảo luận về sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. ELISA cạnh tranh là gì
3. ELISA không cạnh tranh là gì
4. Điểm tương đồng giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh
5. So sánh cạnh nhau - ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh ở dạng bảng
6. Tóm tắt
ELISA cạnh tranh đo nồng độ kháng nguyên trong mẫu thông qua phát hiện nhiễu tín hiệu. Ở đây, xét nghiệm sử dụng một kháng nguyên ức chế. Do đó, nó là một loại ELISA ức chế. Trong quy trình này, các kháng nguyên có trong mẫu cạnh tranh với kháng nguyên tham chiếu đã chọn để liên kết với một lượng kháng thể được dán nhãn cụ thể. Hơn nữa, quy trình này bắt đầu với việc ủ mẫu, với lượng kháng thể được dán nhãn vượt quá. Ngoài ra, kháng nguyên tham chiếu nên được phủ trước trên một đĩa xét nghiệm nhiều giếng. Sau đó, hỗn hợp mẫu nên được thêm vào tấm xét nghiệm có chứa kháng nguyên tham chiếu. Kháng thể tự do sẽ liên kết với kháng nguyên tham chiếu tùy thuộc vào lượng kháng nguyên trong mẫu. Do đó, nếu có nhiều kháng nguyên mẫu hơn, sẽ phát hiện ít kháng nguyên tham chiếu hơn. Do đó, nó tạo ra một tín hiệu yếu hơn.
Hình 01: ELISA
Ngược lại, khi mẫu chứa lượng kháng nguyên ít hơn, càng nhiều kháng nguyên tham chiếu sẽ chiếm các kháng thể và cho tín hiệu mạnh. Do ELISA cạnh tranh cho tín hiệu mạnh hơn khi mẫu chứa lượng kháng nguyên thấp, ELISA cạnh tranh là xét nghiệm rất nhạy cảm, ngay cả đối với các mẫu có số lượng kháng nguyên nhỏ.
Trong một số bộ dụng cụ ELISA cạnh tranh, một kháng nguyên có nhãn được sử dụng thay cho kháng thể được dán nhãn. Ở đây, kháng nguyên được dán nhãn và kháng nguyên mẫu sẽ cạnh tranh để liên kết với kháng thể chính. Tương tự, khi lượng kháng nguyên trong mẫu thấp, lượng kháng nguyên được dán nhãn liên kết với kháng thể sẽ cao hơn và tạo ra tín hiệu mạnh hơn.
Trong số bốn loại ELISA, có ba loại là ELISA không cạnh tranh. Họ là ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp và ELISA sandwich. Tất cả ba định dạng hoạt động theo nguyên tắc chung của ELISA với sự khác biệt nhỏ trong phương pháp luận của họ.
ELISA trực tiếp sử dụng một loại enzyme có nhãn kháng thể chính. Do đó, nó không cần một kháng thể thứ cấp. Do đó, ELISA trực tiếp nhanh hơn các loại ELISA khác. Kháng thể chính sẽ liên kết trực tiếp với kháng nguyên đích bất động có trong bản. Do đó, phản ứng enzyme-cơ chất sẽ diễn ra, tạo ra tín hiệu rõ ràng.
Hình 02: ELISA Sandwich
Không giống như ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp sử dụng một kháng thể chính không nhãn và một enzyme có nhãn kháng thể thứ cấp. Một khi kháng thể chính liên kết với kháng nguyên bất động, kháng thể thứ cấp liên kết với kháng thể chính. Enzyme trong kháng thể thứ cấp sẽ phản ứng với kháng nguyên và tạo ra tín hiệu rõ ràng. Sandwich ELISA khác với cả ELISA trực tiếp và gián tiếp. Ở đây, kháng thể được cố định vào thành của tấm xét nghiệm.
ELISA cạnh tranh là một loại ELISA dựa trên sự hoàn thành giữa kháng nguyên phân tích và kháng nguyên được dán nhãn cho một lượng kháng thể cụ thể hạn chế. Mặt khác, không có sự cạnh tranh như vậy tồn tại giữa kháng nguyên quan tâm và kháng nguyên tham chiếu trong ELISA không cạnh tranh. Do đó, đây là điểm khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh. Tương tự, ELISA cạnh tranh là ELISA ức chế trong khi ELISA không cạnh tranh không phải là ELISA ức chế. Vì vậy, đây cũng là một sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
Hơn nữa, ELISA cạnh tranh phù hợp hơn để đo lượng kháng nguyên thấp. Đó là một phương pháp nhạy cảm. Mặt khác, ELISA không cạnh tranh không phụ thuộc vào số lượng kháng nguyên có trong một mẫu. Do đó, đây cũng là một sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
Dưới đây infographic giải thích sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh là hai loại xét nghiệm ELISA hoặc xét nghiệm miễn dịch liên quan đến enzyme chính. Để tóm tắt sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh, ELISA cạnh tranh dựa vào sự cạnh tranh giữa kháng nguyên quan tâm và kháng nguyên tham chiếu đối với số lượng kháng thể hạn chế. Do đó, ELISA cạnh tranh cũng được đặt tên là ELISA ức chế. Mặt khác, ELISA không cạnh tranh không phụ thuộc vào sự cạnh tranh giữa kháng nguyên đích và kháng nguyên tham chiếu. Nó sử dụng vượt quá lượng kháng thể cụ thể được dán nhãn đối với chất phân tích quan tâm. Do đó, đây là điểm khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh. ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp và ELISA sandwich là ba loại ELISA không cạnh tranh chính.
1. Bio-Rad. Các loại ELISA | Bio-Rad. Tiểu sử, Có sẵn ở đây.
2. Bốn loại ELISA. Cusabio Life Science - Đối tác khoa học sinh học của bạn, có sẵn tại đây.
Bíp Elisa tipus Cảnh By Carolfv333 - Công việc riêng (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
Xét nghiệm miễn dịch Sandwich Sandwich, ELISA 'By NickCT - Công việc riêng (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia