Sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp

Các sự khác biệt chính giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp là miễn dịch huỳnh quang trực tiếp sử dụng một kháng thể duy nhất hoạt động chống lại mục tiêu quan tâm trong khi miễn dịch huỳnh quang gián tiếp sử dụng hai kháng thể để dán nhãn cho mục tiêu quan tâm.

Miễn dịch huỳnh quang hoặc hình ảnh tế bào là một kỹ thuật được sử dụng để dán nhãn cho một kháng nguyên mục tiêu cụ thể với fluorophore. Ở đây, fluorophore là một hợp chất hóa học huỳnh quang có thể phát lại ánh sáng khi bị kích thích ánh sáng. Khi một fluorophore liên kết với kháng nguyên đích, nó cho phép phát hiện phân tử mục tiêu trong mẫu. Để mô tả thêm, khi một kháng nguyên liên kết với một kháng thể cụ thể, nó có thể được kết hợp với fluorophores. Do đó, rất dễ phát hiện sự hiện diện của kháng nguyên đích trong mẫu khi quan sát dưới kính hiển vi huỳnh quang.

Bên cạnh đó, có hai loại miễn dịch huỳnh quang; miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp. Sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp chủ yếu nằm ở số lượng kháng thể được sử dụng và liên hợp fluorophore. Đó là, trong miễn dịch huỳnh quang trực tiếp, fluorophore liên hợp trực tiếp với kháng thể chính trong khi ở miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, fluorophore liên hợp với kháng thể thứ cấp.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp là gì
3. Miễn dịch huỳnh quang gián tiếp là gì
4. Điểm tương đồng giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp
5. So sánh cạnh nhau - Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp ở dạng bảng
6. Tóm tắt

Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp là gì?

Miễn dịch huỳnh quang sử dụng kháng thể để phát hiện các kháng nguyên mục tiêu cụ thể. Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp là một trong hai loại miễn dịch huỳnh quang. Trong miễn dịch huỳnh quang trực tiếp, một kháng thể đơn (kháng thể chính) liên quan và fluorophore liên hợp trực tiếp với kháng thể chính. Khi liên kết kháng thể với kháng nguyên đích, fluorophore phát ra huỳnh quang có thể được phát hiện bằng kính hiển vi huỳnh quang.

Hình 01: Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp

Tuy nhiên, miễn dịch huỳnh quang trực tiếp là một phương pháp đắt tiền vì các kháng thể liên hợp ban đầu rất tốn kém so với các kháng thể thứ cấp. Tuy nhiên, nó không liên quan đến một bước bổ sung do đó, một kỹ thuật ngắn hơn. Hơn nữa, các ràng buộc không đặc hiệu được giảm trong miễn dịch huỳnh quang trực tiếp. Do đó, loài phản ứng chéo là thấp. Nhưng trong phát hiện, độ nhạy của miễn dịch huỳnh quang trực tiếp là yếu so với miễn dịch huỳnh quang gián tiếp .

Miễn dịch huỳnh quang gián tiếp là gì?

Miễn dịch huỳnh quang gián tiếp là loại thứ hai của miễn dịch huỳnh quang liên quan đến hai loại kháng thể như kháng thể nguyên phát và thứ cấp trong ghi nhãn của kháng nguyên đích. Trong phương pháp này, fluorophore kết hợp với kháng thể thứ cấp. Do đó, kỹ thuật này bao gồm một bước bổ sung.

Hình 02: Miễn dịch huỳnh quang

Tuy nhiên, độ nhạy cao trong phương pháp này vì một số fluorophores có thể được kết hợp với các kháng thể thứ cấp và nó làm cho việc phát hiện dễ dàng hơn. Hơn nữa, miễn dịch huỳnh quang gián tiếp ít tốn kém hơn do thực tế là sự kết hợp của các kháng thể thứ cấp ít tốn kém và dễ dàng hơn. So với phương pháp miễn dịch huỳnh quang trực tiếp, phản ứng chéo của loài là cao trong phương pháp gián tiếp.

Điểm giống nhau giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp?

• Chúng là hai loại kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang.
• Kháng thể chính và fluorophore liên quan đến cả hai phương pháp.
• Ngoài ra, phản ứng kháng nguyên-kháng thể xảy ra trong cả hai phương pháp.
• Hơn nữa, cả miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp đều sử dụng kính hiển vi huỳnh quang để phát hiện kháng nguyên.

Sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp là gì?

Miễn dịch huỳnh quang có thể trực tiếp hoặc gián tiếp dựa trên sự kết hợp fluorophore với các kháng thể được sử dụng. Trong miễn dịch huỳnh quang trực tiếp, fluorophore kết hợp với kháng thể chính, là kháng thể đơn liên quan đến kỹ thuật này. Ngược lại, trong miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, fluorophore kết hợp với kháng thể thứ cấp, đây là một trong hai loại kháng thể liên quan đến kỹ thuật. Do đó, sự khác biệt chính giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp là loại kháng thể kết hợp với fluorophore.

Infographic sau đây cung cấp một so sánh cạnh nhau về sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp.

Tóm tắt - Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp

Miễn dịch huỳnh quang là một kỹ thuật được sử dụng để phát hiện sự hiện diện của các kháng nguyên cụ thể trong một mẫu. Kỹ thuật này sử dụng các kháng thể cụ thể. Do đó, trong trường hợp này, các kháng thể kết hợp với fluorophores để phát hiện chúng bằng kính hiển vi huỳnh quang. Hơn nữa, có hai loại miễn dịch huỳnh quang là miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp. Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp liên quan đến một kháng thể đơn và fluorophore kết hợp trực tiếp với kháng thể này. Miễn dịch huỳnh quang gián tiếp liên quan đến hai kháng thể; sơ cấp và thứ cấp và fluorophore kết hợp với kháng thể thứ cấp. Vì một số kháng thể thứ cấp có thể liên kết với một kháng thể chính và một số fluorophores có thể kết hợp với các kháng thể thứ cấp, nên miễn dịch huỳnh quang gián tiếp là phương pháp nhạy cảm hơn so với phương pháp trực tiếp. Hơn nữa, phương pháp gián tiếp ít tốn kém hơn phương pháp trực tiếp. Vì vậy, đây là sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp.

Tài liệu tham khảo:

1. Miễn dịch huỳnh quang. Wikipedia, Wikimedia Foundation, ngày 19 tháng 8 năm 2018. Có sẵn tại đây 

Hình ảnh lịch sự:

1. HSP HSP NẾU IgA Danh của Emmanuelm tại en.wikipedia, (CC BY 3.0) qua Commons Wikimedia
2. Trực tiếp miễn dịch huỳnh quang trực tiếp bởi Westhayl618 - Công việc riêng, (CC BY-SA 4.0) qua Commons Wikimedia