Trong bối cảnh lý thuyết tế bào, tế bào là đơn vị cấu trúc và chức năng cơ bản của tất cả các sinh vật sống. Sắp xếp tế bào là một phương pháp được sử dụng để phân tách các tế bào khác nhau theo các đặc điểm sinh lý và hình thái. Chúng có thể có đặc điểm nội bào hoặc ngoại bào. Sự tương tác của DNA, RNA và protein được coi là thuộc tính tương tác nội bào trong khi hình dạng, kích thước và các protein bề mặt khác nhau được coi là thuộc tính ngoại bào. Trong khoa học hiện đại, các phương pháp phân loại tế bào đã dẫn đến việc hỗ trợ điều tra khác nhau trong các nghiên cứu sinh học và cả việc thiết lập các nguyên tắc mới thông qua nghiên cứu về y học. Sắp xếp tế bào được thực hiện trên các phương pháp khác nhau bao gồm cả nguyên thủy với ít thiết bị và phương pháp công nghệ tiên tiến với việc sử dụng máy móc tinh vi. Dòng tế bào học, phân loại tế bào kích hoạt huỳnh quang (FACS), lựa chọn tế bào từ tính và sắp xếp tế bào đơn là những phương pháp chính được sử dụng. Dòng tế bào học và FACS được phát triển để phân biệt các tế bào theo tính chất quang học của chúng. FACS là một loại tế bào học dòng chảy chuyên dụng. Dòng tế bào học là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử, kích thước và thể tích bề mặt tế bào khác nhau cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. FACS là một quá trình trong đó một hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. Đây là sự khác biệt chính giữa tế bào học dòng chảy và FACS.
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Hình học dòng chảy là gì
3. FACS là gì
4. Điểm tương đồng giữa Hình học dòng chảy và FACS
5. So sánh cạnh nhau - Hình học dòng chảy so với FACS ở dạng bảng
6. Tóm tắt
Dòng tế bào học là một phương pháp được sử dụng để kiểm tra và xác định biểu hiện của các phân tử nội bào và bề mặt tế bào và để xác định và mô tả các loại tế bào khác biệt. Nó cũng được sử dụng trong việc xác định khối lượng tế bào và kích thước tế bào và để đánh giá độ tinh khiết của các quần thể được phân lập. Điều này cho phép đánh giá đa tham số của các ô đơn lẻ cùng một lúc. Dòng tế bào học được sử dụng để đo cường độ huỳnh quang được tạo ra do các kháng thể có nhãn huỳnh quang giúp xác định protein hoặc phối tử liên kết với các tế bào liên quan.
Hình 01: Hình học dòng chảy
Nói chung, tế bào học dòng chảy bao gồm ba hệ thống phụ là chủ yếu. Chúng là chất lỏng, thiết bị điện tử và quang học. Trong tế bào học dòng chảy, năm thành phần chính có sẵn được sử dụng trong sắp xếp tế bào. Chúng là một tế bào dòng chảy (một dòng chất lỏng được sử dụng để vận chuyển chúng và sắp xếp các tế bào cho quá trình cảm biến quang học), một hệ thống đo lường (có thể là các hệ thống khác nhau bao gồm, đèn thủy ngân và xenon, làm mát bằng nước công suất cao hoặc laser làm mát bằng không khí công suất thấp hoặc laser diode), ADC; Hệ thống chuyển đổi tương tự sang số, hệ thống khuếch đại và máy tính để phân tích. Việc mua lại là quá trình thu thập dữ liệu từ các mẫu bằng phương pháp đo dòng chảy. Quá trình này được trung gian bởi một máy tính được kết nối với máy đo lưu lượng dòng chảy. Phần mềm có trong máy tính sẽ phân tích thông tin được cung cấp cho máy tính từ máy đo lưu lượng dòng chảy. Phần mềm cũng có khả năng điều chỉnh các tham số của thí nghiệm kiểm soát tế bào đo dòng chảy.
Trong bối cảnh của tế bào học dòng chảy, Huỳnh quang kích hoạt tế bào phân loại (FACS) là một phương pháp được sử dụng để phân biệt và phân loại mẫu của hỗn hợp các tế bào sinh học. Các ô được tách từ hai hoặc nhiều container. Phương pháp sắp xếp dựa trên các tính năng vật lý của tế bào bao gồm các đặc tính tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của tế bào. Đây là một kỹ thuật khoa học quan trọng, có thể được sử dụng để thu được kết quả định lượng và định lượng đáng tin cậy của tín hiệu huỳnh quang được phát ra từ mỗi tế bào. Trong FACS, ban đầu, hỗn hợp các tế bào thu được trước; một huyền phù được dẫn trực tiếp vào trung tâm của một dòng chất lỏng hẹp đang chảy nhanh. Dòng chảy của chất lỏng được thiết kế để phân tách các tế bào trong huyền phù dựa trên đường kính của mỗi tế bào. Một cơ chế rung được áp dụng cho dòng huyền phù dẫn đến sự hình thành các giọt riêng lẻ.
Hình 02: FACS
Hệ thống được hiệu chỉnh để tạo ra một giọt duy nhất với một ô. Ngay trước khi hình thành các giọt, huyền phù dòng chảy di chuyển dọc theo thiết bị đo huỳnh quang phát hiện đặc tính huỳnh quang của từng tế bào. Tại điểm hình thành các giọt, một vòng sạc điện được đặt trong đó một điện tích được cảm ứng với vòng trước khi đo cường độ huỳnh quang. Khi các giọt được hình thành từ dòng huyền phù, một điện tích bị giữ lại trong các giọt sau đó đi vào hệ thống làm lệch tĩnh điện. Theo điện tích, hệ thống chuyển các giọt vào các thùng chứa khác nhau. Phương pháp áp dụng phí thay đổi tùy theo các hệ thống khác nhau được sử dụng trong FACS. Thiết bị được sử dụng trong FACS được gọi là máy phân loại tế bào kích hoạt huỳnh quang.
Hình học dòng chảy vs FACS | |
Dòng tế bào học là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử, kích thước và thể tích bề mặt tế bào khác nhau cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. | FACS là một quá trình trong đó một hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. |
Tế bào là đơn vị cấu trúc và chức năng cơ bản của tất cả các sinh vật sống. Sắp xếp tế bào là quá trình các tế bào được phân lập và phân biệt thành các loại khác nhau dựa trên các đặc tính nội bào và ngoại bào của chúng. Dòng tế bào học và FACS là hai phương pháp quan trọng trong sắp xếp tế bào. Cả hai quá trình được phát triển để phân biệt các tế bào theo tính chất quang học của chúng. Dòng tế bào học là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử, kích thước và thể tích bề mặt tế bào khác nhau cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. FACS là một quá trình trong đó một hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. Đây là sự khác biệt giữa Flow Cytometry và FACS.
Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa Hình học dòng chảy và FACS