Sự khác biệt giữa nhuộm Gram và axit nhanh

Sự khác biệt chính - Gram Gram vs Acid nhanh
 

Vi khuẩn là những vi sinh vật rất nhỏ. Họ minh bạch, và việc phát hiện của họ rất khó khăn trong điều kiện sống và không ổn định. Do đó, các phương pháp nhuộm khác nhau được phát triển để tạo điều kiện phát hiện vi khuẩn. Có ba loại kỹ thuật nhuộm màu chính: nhuộm đơn giản, nhuộm vi sai và nhuộm cấu trúc. Nhuộm màu khác biệt là một kỹ thuật sử dụng nhiều hơn một vết để phân biệt vi khuẩn. Vết gram và vết axit nhanh được biết đến nhiều nhất là vết khác biệt. Nhuộm Gram là một kỹ thuật nhuộm khác biệt, phân tách vi khuẩn thành hai nhóm được gọi là vi khuẩn gram dương và vi khuẩn gram âm. Vết bẩn axit nhanh là một vết khác biệt được sử dụng để xác định các sinh vật nhanh axit như Mycobacterium từ các sinh vật nhanh không axit. Đây là điểm khác biệt chính giữa nhuộm Gram và nhuộm nhanh Acid.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Nhuộm Gram là gì? 
3. Axit nhanh là gì
4. Điểm tương đồng giữa nhuộm Gram và axit nhanh
5. So sánh cạnh nhau - Nhuộm gram và axit nhanh ở dạng bảng
6. Tóm tắt

Nhuộm Gram là gì?

Nhuộm gram là một kỹ thuật nhuộm vi sai quan trọng được sử dụng để xác định vi khuẩn trong vi sinh. Kỹ thuật này được giới thiệu bởi nhà vi khuẩn học người Đan Mạch Hans Christian Gram vào năm 1884. Nhuộm gram phân loại vi khuẩn thành hai nhóm chính có tên là gram dương và gram âm, rất quan trọng trong việc phân loại và nhận dạng vi khuẩn. Các nhà vi sinh học thực hiện nhuộm gram là bước khởi đầu trong đặc tính của vi khuẩn trong quá trình nghiên cứu.

Vi khuẩn được nhóm lại dựa trên sự khác biệt trong thành tế bào của chúng. Vi khuẩn gram dương bao gồm một lớp peptidoglycan dày trong thành tế bào của chúng trong khi vi khuẩn gram âm được cấu tạo bởi một lớp peptidoglycan mỏng trong thành tế bào của chúng. Kết quả của nhuộm gram sẽ dựa trên sự khác biệt về độ dày của lớp peptidoglycan của thành tế bào.

Nhuộm gram được thực hiện bằng bốn thuốc thử khác nhau là; vết bẩn chính, chất gắn màu, chất khử màu và vết bẩn. Crystal violet và safranin được sử dụng làm vết bẩn chính và vết bẩn tương ứng, trong khi gram iốt và 95% cồn được sử dụng làm chất gắn màu và chất khử màu tương ứng. Các bước cơ bản của gram gram như sau;

1. Một phết vi khuẩn được chuẩn bị trên một phiến kính sạch, nhiệt cố định và làm mát.
2. Smear tràn ngập pha lê tím trong 1 - 2 phút.
3. Smear được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm để loại bỏ vết bẩn dư thừa.
4. Gram iốt được áp dụng để bôi trong 1 phút.
5. Smear được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm
6. Smear được rửa bằng cồn 95% trong 2 - 5 giây và rửa sạch bằng nước máy chảy chậm.
7. Smear được nhuộm màu với safranin trong 1 phút
8. Smear được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm, sấy khô và quan sát dưới kính hiển vi.

Vào cuối vết gram, vi khuẩn gram âm sẽ được quan sát thấy trong màu hồng trong khi vi khuẩn gram dương sẽ được quan sát thấy trong màu tím.

Hình 01: Vi khuẩn gram âm và gram dương

Kết quả của vết gram được quyết định bởi độ dày của lớp peptidoglycan trong thành tế bào của chúng. Trong bước khử màu, vết bẩn chính và chất gắn màu dễ dàng được loại bỏ khỏi vi khuẩn gram âm và trở nên không màu vì chúng có lớp peptidoglycan mỏng. Các vết bẩn chính được giữ lại trong vi khuẩn gram dương vì chúng có lớp peptidoglycan dày. Các vết bẩn sẽ không có hiệu quả đối với vi khuẩn gram dương do sự lưu giữ của vết bẩn chính. Do đó, vi khuẩn gram dương sẽ được nhìn thấy trong màu vết bẩn chính, đó là màu tím. Các vết bẩn sẽ làm vấy bẩn vi khuẩn gram âm, và chúng sẽ được nhìn thấy trong màu chọn, đó là màu safranin. Do đó, thật dễ dàng để phân loại vi khuẩn thành hai nhóm theo vết gram và nó có giá trị trong việc phân biệt và nhận dạng vi khuẩn.

Axit nhanh là gì?

Độ bền axit là một đặc tính vật lý của một số vi khuẩn, đặc biệt là khả năng chống khử màu của axit trong quá trình nhuộm. Sau khi nhuộm, các sinh vật này chống lại các quy trình khử màu dựa trên axit và hoặc ethanol pha loãng phổ biến trong nhiều giao thức nhuộm. Do đó, tên 'axit nhanh' được đặt cho những sinh vật đó. Đặc tính này được thể hiện do có một lượng lớn chất sáp (axit mycolic) trong thành tế bào của chúng. Thử nghiệm này là rất quan trọng để xác định Mycobacterium tuberculosis.

Hình 2: Mycobacteria axit nhanh

Vết bẩn axit nhanh này được Paul Ehrlich phát triển vào năm 1882. Kỹ thuật axit nhanh của Ehrlich đã được sửa đổi bởi Ziehl-Neelsen và hiện được sử dụng thường xuyên hơn. Quy trình nhuộm nhanh axit bao gồm ba thuốc thử khác nhau. Carbol fuschin được sử dụng làm vết bẩn chính. Rượu axit được sử dụng làm chất khử màu. Methylene Blue được sử dụng làm vết bẩn. Quy trình nhuộm được thực hiện như sau.

1. Vết bẩn chính (carbol fuchsin) được áp dụng cho mẫu cố định trên slide (Tất cả các ô sẽ được nhuộm màu đỏ).
2. Trượt được làm nóng bằng cách hấp trong 5 phút, điều này dẫn các vết bẩn vào các tế bào đúng cách.
3. Sau đó, dung dịch khử màu được thêm vào (Cách này loại bỏ thuốc nhuộm màu đỏ khỏi tất cả các tế bào ngoại trừ vi khuẩn nhanh axit).
4. Xanh methylen được thêm vào như một vết bẩn (Nó tô màu tất cả các tế bào vi khuẩn bị mất màu).
5. Vi khuẩn nhanh axit vẫn còn màu đỏ trong khi vi khuẩn nhanh không màu có màu xanh lam.

Điểm giống nhau giữa nhuộm Gram và axit nhanh?

• Nhuộm gram và Acid nhanh là hai kỹ thuật nhuộm vi sai.
• Cả hai kỹ thuật phân loại vi khuẩn thành hai nhóm.
• Cả hai kỹ thuật sử dụng hai vết bẩn và một khử màu.

Sự khác biệt giữa nhuộm Gram và axit nhanh?

Nhuộm Gram vs Axit nhanh
Nhuộm gram là kỹ thuật nhuộm vi phân, phân tách vi khuẩn thành hai nhóm vi khuẩn gram dương và vi khuẩn gram âm.	Vết axit nhanh là vết khác biệt được sử dụng để xác định các sinh vật nhanh axit từ các sinh vật không axit nhanh.
Vết bẩn chính
Crystal violet là vết bẩn chính được sử dụng phổ biến trong nhuộm gram.	Carbol fuchsin là vết bẩn chính được sử dụng trong axit nhanh.
Chất khử màu
Rượu 95% được sử dụng làm chất khử màu trong vết gram.	Rượu axit được sử dụng như một chất khử màu trong axit nhanh.
Vết bẩn
Nhuộm gram sử dụng safranin làm vết bẩn.	Vết axit nhanh sử dụng màu xanh metylen làm vết bẩn.
Quan sát
Vi khuẩn gram âm được quan sát thấy trong màu chọn và vi khuẩn gram dương được quan sát thấy trong màu tím.	Vi khuẩn axit nhanh được quan sát thấy trong màu đỏ và vi khuẩn không axit nhanh được quan sát thấy trong màu xanh lam.

Tóm tắt - Gram Gram vs Acid nhanh

Hình dung các vi sinh vật trong trạng thái sống là khó khăn. Do đó, vết bẩn sinh học và quy trình nhuộm màu được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu tính chất của chúng. Nhuộm màu khác biệt là một loại kỹ thuật nhuộm được sử dụng để phân biệt vi khuẩn. Nhuộm gram và nhuộm nhanh axit là hai kỹ thuật nhuộm khác biệt. Nhuộm gram phân biệt vi khuẩn gram âm và vi khuẩn gram dương dựa trên độ dày của thành tế bào. Nhuộm axit nhanh phân biệt vi khuẩn nhanh axit với vi khuẩn không axit nhanh dựa trên hàm lượng axit mycolic trong thành tế bào. Đây là sự khác biệt giữa axit nhanh và vết gram.

Tải xuống phiên bản PDF của Gram Stain vs Acid Fast

Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa nhuộm Gram và axit nhanh.

Người giới thiệu:

1. Aryal, Sagar. Vết axit-vết bẩn nhanh- Nguyên tắc, thủ tục, giải thích và ví dụ. Ghi chú vi sinh trực tuyến. N.p., ngày 08 tháng 5 năm 2017. Web. Có sẵn ở đây. Ngày 20 tháng 7 năm 2017.
2. Các vết khác biệt để xác định vi khuẩn: Gram, Acid-fast & Endospore. N.p., n.d. Web. Có sẵn ở đây. Ngày 20 tháng 7 năm 2017.

Hình ảnh lịch sự:

1. Nút bạch huyết - Nhiễm mycobacterial không điển hình (MAI) - AFB nhuộm vết thương bởi Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) qua Flickr
2. Stt Gram Gram 01 01 By By By tam tam - Tập tin của Y tambe (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia