Các sự khác biệt chính giữa HPLC và HPLC nhanh là thế áp suất bơm mà chúng tôi sử dụng cho HPLC là khoảng 40 MPa trong khi áp suất bơm cho HPLC nhanh là khoảng 3-5 MPa.
Kỹ thuật phổ biến nhất mà chúng tôi sử dụng để tách các thành phần của hỗn hợp là sắc ký lỏng chất lỏng. Có một số kỹ thuật để đạt được mục đích này trong đó HPLC rất phổ biến. HPLC là viết tắt của Sắc ký lỏng hiệu năng cao, xác định, định lượng và tách các thành phần của hỗn hợp lỏng một cách nhanh chóng và hiệu quả. HPLC nhanh là một ứng dụng đặc biệt của HPLC, đã thu hút sự chú ý của những người tham gia nghiên cứu các giải pháp.
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. HPLC là gì
3. HPLC nhanh là gì
4. So sánh cạnh nhau - HPLC so với HPLC nhanh ở dạng bảng
5. Tóm tắt
HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao. Nó sử dụng áp suất cao để đẩy dung môi để chúng đi qua một cột. Ngoài ra, đây là một cách lý tưởng để phân tách và nghiên cứu các hợp chất khác nhau như axit amin, axit nucleic, carbohydrate, steroid, kháng sinh và hydrocarbon. HPLC có nhiều ưu điểm so với các phương pháp tách hỗn hợp khác như độ phân giải cao hơn và phân tích nhanh hơn. Nó xóa sạch nhu cầu đóng gói lại và tái tạo và cung cấp khả năng kiểm soát tốt hơn các tham số và do đó, làm tăng hiệu quả của việc phân tách. Lý tưởng nhất, HPLC phù hợp với các ứng dụng quy mô lớn vì nó có thể tách các hạt rất nhỏ và cho phép sử dụng áp suất cao giúp dung môi dễ dàng chảy.
Hình 01: Cột HPLC
Tóm lại, phương pháp hoạt động của kỹ thuật HPLC như sau. Đầu tiên, chúng ta nên đưa mẫu vào dòng pha động với số lượng nhỏ riêng biệt bằng cách sử dụng máy bơm. Áp suất bơm phải được duy trì ở mức 40 MPa. Luồng pha di động này thấm qua cột HPLC. Sau đó, các thành phần trong mẫu cũng đi qua cột. Tuy nhiên, tốc độ di chuyển của chúng khác nhau do sự khác biệt về tương tác giữa các thành phần mẫu và chất hấp phụ bên trong cột. Chúng tôi gọi chất hấp phụ này là pha đứng yên vì nó nằm trong cột (không di chuyển). Sau đó, ở cuối cột, chúng ta có thể thu thập mẫu rửa giải từ cột, do đó, chúng ta có thể thu thập các thành phần trong mẫu một cách riêng biệt.
Gần đây, các nhà khoa học nghiên cứu tại viện nghiên cứu Schering Plough đã phát triển một kỹ thuật HPLC nhanh chóng, đây là phiên bản tiên tiến của HPLC vì nó cho phép tách các hợp chất ra khỏi hỗn hợp nhanh hơn. Ngoài ra, được gọi là HPLC nhanh, kỹ thuật này sử dụng các hạt silica lõi hợp nhất 2,7um được tạo ra bằng cách nung chảy silica xốp 0,5um trên một hạt silica rắn. Những hạt được tạo ra độc đáo này làm cho quá trình phân tách rất nhanh và quá áp suất thấp hơn so với những gì chúng ta sử dụng trong HPLC.
Hình 02: Bộ máy FPLC
HPLC nhanh có kết quả tương đương với UPLC, nhưng các nhà khoa học cho rằng kỹ thuật này vượt trội vì nó không yêu cầu thiết bị áp suất siêu cao rất đắt tiền. Điều tuyệt vời là HPLC nhanh không yêu cầu bất kỳ giao thức phòng thí nghiệm mới nào.
HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao và HPLC nhanh là một dạng tiên tiến của sắc ký lỏng hiệu năng cao. Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPLC nhanh là áp suất bơm mà chúng tôi sử dụng cho HPLC là khoảng 40 MPa. Trong khi đó, áp suất bơm cho HPLC nhanh là khoảng 3-5 MPa. Hơn nữa, chúng ta có thể tách các hợp chất khác nhau như axit amin, axit nucleic, carbohydrate, steroid, kháng sinh và hydrocarbon bằng kỹ thuật HPLC trong khi kỹ thuật HPLC nhanh chủ yếu được sử dụng để tách protein.
Infographic dưới đây trình bày thêm thông tin về sự khác biệt giữa HPLC và HPLC nhanh.
HPLC là một kỹ thuật sắc ký lỏng đã trở nên rất phổ biến trên toàn thế giới. Fast HPLC là phiên bản mới của HPLC, các nhà khoa học nghiên cứu tại Viện Schering Plough đã phát triển kỹ thuật mới này. Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPLC nhanh nằm ở áp suất bơm mà chúng ta sử dụng để phân tách. Đó là; áp suất bơm mà chúng tôi sử dụng cho HPLC là khoảng 40 MPa. Nhưng, áp suất bơm cho HPLC nhanh là khoảng 3-5 MPa.
1. Sắc ký lỏng hiệu năng cao. Wikipedia, Wikimedia Foundation, ngày 20 tháng 10 năm 2018. Có sẵn tại đây
Bạn cần một hệ thống ưa thích để chạy HPLC nhanh - hay bạn? HPLC nhanh - CHROMacademy. Có sẵn ở đây
1. JOLave HPLC kolom Cửa Jmave, RCvanwijk - Người bảo vệ Eigen, (Tên miền công cộng) qua Commons Wikimedia
2. Phòng thí nghiệm của phòng thí nghiệm của phòng thí nghiệm của Stephen bởi Stephen Helms từ Dallas, TX, Hoa Kỳ - Phòng thí nghiệm của chúng tôi, (CC BY-SA 2.0) qua Wikimedia của Commons