Sự khác biệt giữa Phusion và Taq polymerase

Sự khác biệt chính - Phusion vs Taq Polyme

DNA polymerase là enzyme được sử dụng rộng rãi trong các kỹ thuật sinh học phân tử và cũng có mặt tự nhiên trong tất cả các sinh vật trải qua quá trình sao chép DNA. Chúng là các enzyme trùng hợp quan trọng liên quan đến quá trình sao chép. DNA polymerase có khả năng thêm nucleotide vào đầu 3 'miễn phí của chuỗi DNA do đó gây ra sự mở rộng của một chuỗi mới. Hiện nay, do sự phát triển của sinh học phân tử trong chẩn đoán bệnh và ứng dụng công nghiệp, điều quan trọng là sản xuất polymerase có nhiều đặc tính có lợi khác nhau. Điều này làm tăng độ chính xác của phương pháp và làm cho nó trở thành một kỹ thuật nhanh hơn. Phusion và Taq polymerase là hai enzyme polymerase ổn định nhiệt được sản xuất thương mại được sử dụng trong các ứng dụng phân tử đặc biệt. Phusion là một DNA polymerase được phân lập từ Pyrococcus furiosus và chủ yếu được sử dụng trong các thí nghiệm nhân bản để tăng độ trung thực. Taq DNA polymerase là DNA polymerase tiêu chuẩn được sử dụng trong Phản ứng chuỗi polymerase (PCR), và nó được phân lập từ vi khuẩn chịu nhiệt; Bình thủy. Các sự khác biệt chính giữa hai enzyme là vi sinh vật nguồn. Phusion được phân lập từ cực trị, Pyrococcus furiosus trong khi đó, Taq polymerase được phân lập từ thermophile, Bình thủy.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Phusion là gì
3. Taq polymerase là gì
4. Điểm tương đồng giữa Phusion và Taq polymerase
5. So sánh cạnh nhau - Phusion vs Taq polymerase ở dạng bảng
6. Tóm tắt

Phusion là gì?

DNA polymerase là một polymerase mới được sản xuất bằng cách phân lập enzyme từ Pyrococcus furiosus, đó là một Archaea cực trị. Những vi khuẩn này cư trú trong điều kiện nhiệt độ cực cao, do đó làm cho polymerase trở thành polymerase có tính bền nhiệt cao. Phusion polymerase được sử dụng để có được độ trung thực cực cao so với polymerase ổn định nhiệt thông thường; Taq polymerase. Phusion polymerase có khả năng khuếch đại các mẫu dài lên tới 7,5kb DNA bộ gen. Khả năng trùng hợp tối ưu của Phusion polymerase là 72⁰C. Phusion cũng được sử dụng trong các sản phẩm nhân bản để giải trình tự, phân tích biểu hiện và phân tích đột biến.

Phusion DNA polymerase có hoạt tính exonuclease 3 '- 5'. Điều này cho phép hiệu đính chuỗi mới được tổng hợp sau khi tổng hợp. Do đó, sự không phù hợp nucleotide dễ dàng được sửa chữa. Do đó, nó có tỷ lệ lỗi ít hơn. Ưu điểm chung của Phusion polymerase là;

Độ trung thực cao
Tốc độ cao và giảm thời gian gia hạn
Phản ứng mạnh mẽ và yêu cầu tối ưu hóa tối thiểu
Năng suất cao

Hình 01: Phusion

Nhược điểm chính của Phusion polymerase là nó bị ức chế khi có deoxyuridine triphosphate (dUTP). Khi dUTP được tích lũy trong hỗn hợp phản ứng, nó có thể ức chế hoạt động của Phusion polymerase. Điều này được ngăn chặn bằng cách xử lý hỗn hợp phản ứng với dUTPase trước khi thêm enzyme. Hiện tại, một biến thể kháng Phusion polymerase kháng dUTP được gọi là Pfu Turbo được sử dụng thay cho Phusion polymerase như một phương thuốc cho vấn đề này.

Taq polymerase là gì?

DNA polymerase Taq phát minh đã cách mạng hóa lĩnh vực sinh học phân tử. Nó đã giải quyết một vấn đề lớn trong khuếch đại DNA. Taq DNA polymerase là enzyme polymerase bền nhiệt được chiết xuất và phân lập từ vi khuẩn ưa nhiệt, Bình thủy. Việc phát hiện ra enzyme này dẫn đến sự phát triển của PCR. Enzyme này đã cho phép sử dụng phản ứng chuỗi polymerase trong khuếch đại DNA thay vì các kỹ thuật nhân bản thông thường. PCR hiện được sử dụng trong chẩn đoán phân tử, nông nghiệp và công nghiệp với nhiều biến thể mới được thêm vào kỹ thuật.

Hình 02: Taq polymerase

Chức năng Taq DNA polymerase ở khoảng nhiệt độ tối ưu giữa 72⁰C - 80⁰C. Taq DNA polymerase cần có đồng yếu tố; magiê cho chức năng của nó. Taq polymerase không có khả năng đọc lại 3 '- 5', do đó, tỷ lệ lỗi của Taq DNA polymerase cao so với các loại polymerase DNA mới hơn như Phusion polymerase, v.v. Nhưng, sự phổ biến của Taq DNA polymerase vẫn là giống nhau trên toàn thế giới của khoa học do sự tiện lợi và tính linh hoạt của enzyme.

Điểm giống nhau giữa Phusion và Taq polymerase là gì?

Cả hai enzyme Phusion và Taq polymerase đều là các enzyme trùng hợp có khả năng thêm nucleotide vào đầu sợi 3 'miễn phí của chuỗi DNA.
Cả Phase và Taq polymerase đều yêu cầu trình tự mồi để bắt đầu trùng hợp.
Cả Phase và Taq polymerase đều ổn định nhiệt.
Cả Phase và Taq polymerase đều được sử dụng trong cơ chế PCR để khuếch đại DNA.
Khi thêm polymerase vào hỗn hợp phản ứng, cả Phase và Taq polymerase đều được thêm vào sau cùng để đảm bảo hiệu quả của enzyme.
Cả Phase và Taq polymerase đều được tổng hợp thương mại cho mục đích thí nghiệm sinh học phân tử.
Cả Phase và Taq polymerase đều cần một đồng yếu tố để hoàn thành chức năng của nó.

Sự khác biệt giữa Phusion và Taq polymerase là gì?

Phusion vs Taq polymerase
Phusion là một DNA polymerase được phân lập từ Pyrococcus furiosus và chủ yếu được sử dụng trong các thí nghiệm nhân bản để tăng độ trung thực.	Taq DNA polymerase là DNA polymerase tiêu chuẩn được sử dụng trong Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) và nó được phân lập từ vi khuẩn chịu nhiệt, Bình thủy.
Nguồn sinh vật
Phusion được chiết xuất từ archaea cực trị - Pyrococcus furiosus.	Những tác phẩm văn học này trải dài từ thời kỳ thuộc địa đến thời kỳ khử màu.
Khả năng đọc bằng chứng
Khả năng đọc bằng chứng 3 '- 5' có trong Phusion.	Khả năng đọc bằng chứng 3 '- 5' không có trong Taq polymerase.
Lòng trung thành
Độ trung thực cao là có với Phusion.	Taq polymerase cho thấy độ trung thực thấp.
Khuếch đại
Phusion có khả năng khuếch đại các đoạn DNA dài.	Taq polymerase có khả năng khuếch đại các đoạn DNA ngắn hơn nhiều.
ngộ độc dUTP
Hành động phusion bị ức chế bởi sự tích lũy lẻ.	Taq polymerase không bị ức chế bởi dUPT.

Tóm lược - Phusion vs Taq polymerase

Phusion và Taq DNA polymerase là hai polymerase bền nhiệt được sử dụng trong kỹ thuật PCR. Phusion là một polymerase được phân lập từ extremophile, Pyrococcus furiosus Trong khi đó, Taq được phân lập từ các vi khuẩn ổn định nhiệt Bình thủy. Phát hiện Taq DNA polymerase dẫn đến phát minh PCR. Phusion có nhiều ưu điểm so với Taq đã khiến Phusion trở thành một lựa chọn tốt hơn trong việc tạo ra DNA có độ trung thực cao. Tuy nhiên, Taq polymerase vẫn được sử dụng làm enzyme polymerase tiêu chuẩn trong PCR. Đây là sự khác biệt giữa Phusion và Taq polymerase.

Tài liệu tham khảo:

1.Biolabs, New England. Polymer Taq DNA polymerase. New England Biolabs: Thuốc thử cho ngành khoa học sự sống. Có sẵn ở đây
2. DNA Phusion DNA polymerase. Biolabs mới của Anh. Có sẵn ở đây

Hình ảnh lịch sự:

1.'GAM được minh họa bởi Nivin Nasri'By NivinN - Công việc riêng, (CC BY-SA 4.0) qua Commons Wikimedia
2.'Taq'By Adenosine - Công việc riêng, (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia

Khoa học & Tự nhiên