Sự khác biệt giữa HPLC pha ngược và pha thường

Các sự khác biệt chính giữa HPLC pha ngược và pha bình thường là HPLC pha đảo sử dụng pha tĩnh phân cực và pha động cực ít hơn trong khi HPLC pha thông thường sử dụng pha tĩnh không phân cực và pha động cực.

HPLC pha thông thường là kỹ thuật HPLC lâu đời nhất mà Tswett sử dụng trong việc tách chiết xuất thực vật của mình; ông dùng phấn trong một cột thủy tinh. Đây là chế độ sắc ký cổ điển dẫn đến việc đặt tên cho nó là kỹ thuật bình thường. Mặt khác, HPLC pha đảo ngược lại, ngược lại với kỹ thuật thông thường, mà các nhà khoa học đã phát triển gần đây.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. HPLC pha đảo là gì
3. HPLC pha thông thường là gì
4. So sánh cạnh nhau - Pha đảo ngược so với HPLC pha thông thường ở dạng bảng
5. Tóm tắt

HPLC pha đảo là gì?

HPLC pha đảo là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh kỵ nước. Trong số tất cả các phương pháp HPLC, chúng tôi sử dụng phương pháp này khoảng 70% vì tính ứng dụng rộng rãi và khả năng tái tạo của nó. Pha tĩnh là không cực và pha động là cực.

Hầu hết thời gian, các nhà khoa học sử dụng hỗn hợp nước với dung môi hữu cơ phân cực, có thể trộn được, như acetonitril hoặc metanol làm pha động. Do đó, các chất phân tích tương tác với pha tĩnh không phân cực.

HPLC pha thông thường là gì?

HPLC pha thông thường là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh ưa nước. Đây là phương pháp truyền thống của HPLC, mặc dù chúng tôi không sử dụng nó nhiều. Pha tĩnh là cực, và pha động là không cực. Quan trọng hơn, pha động của kỹ thuật này là 100% hữu cơ. Nó có nghĩa là không có nước được sử dụng cho việc này.

Hình 01: Một hồ sơ mẫu cho sắc ký đồ HPLC pha thông thường và pha ngược theo độ phân cực của các thành phần trong chất phân tích.

Thông thường, pha tĩnh có chứa silica, cyano, diol, pha liên kết amino, v.v ... Các pha di động bao gồm các dung môi hữu cơ như hexane, ethyl acetate, v.v. Kỹ thuật này dựa trên việc giữ lại các phân tử dung môi hoặc chất phân tích.

Sự khác biệt giữa HPLC pha ngược và pha thường?

HPLC pha đảo là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh kỵ nước. Giai đoạn đứng yên của kỹ thuật này là không cực. Pha tĩnh là không cực trong khi pha động là cực. Hơn nữa, các nhà khoa học sử dụng hỗn hợp nước với dung môi hữu cơ phân cực, có thể trộn được, chẳng hạn như acetonitril hoặc metanol làm pha động trong HPLC pha đảo. Trong khi đó, HPLC pha bình thường là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh ưa nước. Giai đoạn đứng yên của kỹ thuật này là cực. Pha tĩnh là cực trong khi pha động là không cực. Thêm vào đó, các nhà khoa học sử dụng các dung môi hữu cơ như hexane, ethyl acetate, v.v. làm pha động của HPLC pha thông thường. Infographic dưới đây trình bày sự khác biệt giữa HPLC pha đảo ngược và HPLC pha thông thường ở dạng bảng.

Tóm tắt - Đảo ngược pha với HPLC pha bình thường

Kỹ thuật HPLC pha ngược và pha thông thường là hai kỹ thuật sắc ký lỏng. Sự khác biệt giữa HPLC pha đảo và HPLC pha ngược là HPLC pha ngược sử dụng pha tĩnh phân cực và pha động cực ít trong khi HPLC pha thông thường sử dụng pha tĩnh không phân cực và pha động cực.

Tài liệu tham khảo:

1. Vùng biển. Chế độ phân tách HPLC. HPLC - Sắc ký lỏng hiệu năng cao Giải thích: Waters. Có sẵn ở đây