Sự khác biệt giữa RP HPLC và HIC

Các sự khác biệt chính giữa RP HPLC và HIC là RP HPLC sử dụng pha động cực hơn và pha tĩnh ít cực hơn. Trong khi đó, HIC sử dụng pha tĩnh kỵ nước cho phép các phân tử kỵ nước bám vào nó.

Sắc ký là một kỹ thuật phân tích giúp tách hỗn hợp thành các thành phần của nó. Đầu tiên, chúng ta phải hòa tan mẫu để tách thành dung dịch. Hỗn hợp dung dịch-chất này được gọi là pha động. Sau đó, pha động được truyền qua một vật liệu khác gọi là pha tĩnh. Pha tĩnh xác định sự phân tách của các thành phần. Sự phân tách xảy ra do sự phân vùng vật liệu giữa pha động và pha tĩnh.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. RP HPLC là gì
3. HIC là gì
4. So sánh cạnh nhau - RP HPLC so với HIC ở dạng bảng
5. Tóm tắt

RP HPLC là gì?

Thuật ngữ RP HPLC là viết tắt của Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao pha ngược. Nó liên quan đến việc tách các thành phần trong một hỗn hợp, theo tính kỵ nước. Các thành phần kỵ nước trong pha động liên kết với các phối tử kỵ nước cố định trên pha tĩnh, trong khi các thành phần kỵ nước rửa giải qua pha tĩnh mà không dính vào bề mặt của pha tĩnh.

Hình 01: Bộ máy HPLC

Hơn nữa, phương pháp này có khả năng tái tạo nhiều hơn so với các kỹ thuật sắc ký khác và nó cũng cho thấy khả năng ứng dụng rộng rãi. Do đó, chúng tôi sử dụng phương pháp này trong các phòng thí nghiệm cho hơn 75% tất cả các phương pháp HPLC. Hầu hết thời gian, chúng tôi sử dụng hỗn hợp nước với dung môi hữu cơ phân cực có thể trộn được làm pha động. Vì vậy, nó sẽ đảm bảo sự gắn kết của các thành phần kỵ nước trong dung dịch với bề mặt của pha tĩnh.

HIC là gì?

Thuật ngữ HIC là viết tắt của Sắc ký tương tác kỵ nước. Nó là một loại HPLC pha đảo ngược, và phương pháp này được sử dụng chủ yếu để tách các phân tử sinh học lớn như protein. Trong phương pháp này, chúng ta cần sử dụng môi trường nước để tạo mẫu của phân tử sinh học. Đó là bởi vì dung môi hữu cơ có thể gây biến tính protein. Hơn nữa, kỹ thuật này sử dụng sự tương tác giữa các phân tử lớn với bề mặt hơi kỵ nước của pha tĩnh. Hơn nữa, chúng tôi phải sử dụng nồng độ muối cao trong mẫu vì nó khuyến khích protein được giữ lại trên bao bì; quá trình này được gọi là muối ra. Bằng cách giảm dần nồng độ muối, chúng ta có thể làm cho các phân tử sinh học tách biệt theo tính kỵ nước của chúng.

Thông thường, phương pháp này sử dụng các điều kiện ngược lại với phương pháp sắc ký trao đổi ion. Trong kỹ thuật này, trước tiên, chúng ta cần truyền dung dịch đệm qua cột để giảm độ hòa tan của chất tan trong mẫu. Nó làm cho các vùng kỵ nước của protein lộ ra. Tuy nhiên, khi phân tử kỵ nước hơn, cần ít muối hơn để thúc đẩy liên kết. Ở đây, các chất hòa tan kỵ nước ít hơn được rửa giải trước, và theo sự thay đổi nồng độ muối, các chất hòa tan kỵ nước hơn được rửa giải sau cùng.

Sự khác biệt giữa RP HPLC và HIC là gì?

Sắc ký là một kỹ thuật phân tích để tách các thành phần trong hỗn hợp. RP HPLC và HIC là hai kỹ thuật sắc ký chuyên dụng. Sự khác biệt chính giữa RP HPLC và HIC là RP HPLC sử dụng pha động cực hơn và pha tĩnh ít phân cực hơn, trong khi HIC sử dụng pha tĩnh kỵ nước, cho phép các phân tử kỵ nước bám vào nó.

Infographic dưới đây tóm tắt sự khác biệt giữa RP HPLC và HIC.

Tóm tắt - RP HPLC so với HIC

Tài liệu tham khảo:

1. Chế độ phân tách HPLC. Vùng biển, có sẵn ở đây.

Hình ảnh lịch sự:

1. HPLC Chuẩn bị HPLC của By bởi GYassineMrabetTalk & # x2709; Hình ảnh vector không xác định W3C này được tạo bằng Inkscape. - Công việc riêng (CC BY 3.0) qua Commons Wikimedia

Khoa học & Tự nhiên