Sự khác biệt giữa HPLC và HPTLC

Sự khác biệt chính - HPLC so với HPTLC
 

Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPTLC là HPLC cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu trong khi HPTLC không cho phép phân tách định lượng các thành phần trong mẫu.

Sắc ký là phương pháp tách vật lý được sử dụng để tách và xác định các thành phần trong hỗn hợp. Cả HPLC và HPTLC đều là kỹ thuật sắc ký. HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao. HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. HPLC là gì
3. HPTLC là gì
4. So sánh cạnh nhau - HPLC vs HPTLC ở dạng bảng
5. Tóm tắt

HPLC là gì?

HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao. Nó là một kỹ thuật phân tích được sử dụng để tách, xác định và định lượng các thành phần trong hỗn hợp. Trong kỹ thuật này, mẫu được hòa tan trong một dung môi thích hợp. Sau đó dung môi với mẫu được đưa qua một bơm có áp suất cho trước. Máy bơm chứa đầy vật liệu hấp phụ rắn. Sau đó, một số thành phần liên kết mạnh với vật liệu hấp thụ trong khi các thành phần khác liên kết lỏng lẻo. Điều này làm cho các thành phần có tốc độ dòng chảy khác nhau thông qua máy bơm. Do đó, các thành phần có thể được tách ra dễ dàng.

Hình 01: Hệ thống HPLC

Các vật liệu hấp phụ làm đầy máy bơm được gọi là giai đoạn đứng yên. Dung môi với mẫu hòa tan được gọi là pha động. Bơm được sử dụng trong kỹ thuật này được gọi là cột. Cột chứa đầy một vật liệu hấp phụ, phổ biến nhất là các hạt silica. Kích thước của các hạt này có thể dao động từ 2-50 μm. Quá trình phân tách bị ảnh hưởng bởi thành phần của pha động và nhiệt độ của hệ thống. Các tương tác giữa pha tĩnh và thành phần trong mẫu có thể là tương tác kỵ nước, tương tác lưỡng cực - lưỡng cực, liên kết ion, v.v..

Áp suất hoạt động của HPLC cao hơn đáng kể so với sắc ký lỏng truyền thống. Nó nằm khoảng 50-350 bar. Sự khác biệt giữa sắc ký lỏng và HPLC là trong sắc ký lỏng, mẫu rơi qua cột dưới trọng lực trong khi, trong HPLC, mẫu được điều áp qua cột. Kích thước của cột và các hạt hấp thụ cũng rất nhỏ khi so sánh với sắc ký lỏng truyền thống. Tuy nhiên, độ phân giải được cung cấp bởi kỹ thuật HPLC là vượt trội.

HPTLC là gì?

HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao. Đây là hình thức tiên tiến và tự động của TLC truyền thống. Kỹ thuật này cung cấp một độ phân giải hiệu quả trong một khoảng thời gian ngắn. Trong phương pháp phân tích này, mẫu và tham chiếu có thể được phân tích cùng một lúc, cho phép so sánh mẫu với tham chiếu. Nó cho độ chính xác phân tích được cải thiện hơn so với các kỹ thuật sắc ký khác. Thời gian để phân tích là ít hơn. Kỹ thuật này là một kỹ thuật chi phí thấp.

Hình 02: Phân tích thuốc nhuộm thực phẩm bằng HPTLC

Phương pháp HPTLC là một quy trình đơn giản và bước chuẩn bị mẫu cũng được loại bỏ (Trong TLC truyền thống, bước chuẩn bị mẫu được đưa vào trước khi tách. Bước này bao gồm làm sạch và làm giàu). Dung môi có thể được sử dụng trực tiếp mà không cần xử lý trước mặc dù các kỹ thuật sắc ký khác yêu cầu xử lý trước như khử khí, lọc, v.v..

Vật liệu hấp phụ được sử dụng trong HPTLC là silica với kích thước hạt rất nhỏ. Trong TLC truyền thống, kích thước hạt của silica là 5-20 whereasm trong khi đó, trong HPTLC, nó là 4-8 μm. Mẫu được áp dụng cho tấm HPTLC bằng cách sử dụng dụng cụ bôi. Nó cung cấp cho một ứng dụng thống nhất và an toàn. Sau đó các tấm được đặt trong một buồng có pha động. Buồng phải được bão hòa với hơi của pha động. Sau quá trình HPTLC, các điểm đã di chuyển có thể được phát hiện. Khi phát hiện các đốm trên tấm, kỹ thuật HPTLC sử dụng vùng UV thích hợp hoặc buồng chứa iốt.

Sự khác biệt giữa HPLC và HPTLC là gì?

HPLC vs HPTLC
HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao.	HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao.
Kỹ thuật
Trong HPLC, pha động với dung môi được truyền qua một cột chứa đầy pha tĩnh.	Trong HPTLC, mẫu được phát hiện trên tấm TLC và được đặt bên trong buồng chứa pha động; sau đó mẫu được phép di chuyển lên trên tấm cùng với pha động.
Đo đạc
Trong HPLC, sự khác biệt giữa tốc độ dòng chảy của các thành phần qua cột được sử dụng để tách các thành phần trong mẫu.	Trong HPTLC, sự khác biệt giữa các khoảng cách di chuyển của từng thành phần trong mẫu được sử dụng để tách các thành phần trong mẫu.
Tách định lượng
HPLC cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu.	HPTLC không cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu.

Tóm tắt - HPLC vs HPTLC

HPLC và HPTLC là hai kỹ thuật sắc ký. Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPTLC là HPLC cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu trong khi HPTLC không cho phép phân tách định lượng các thành phần trong mẫu.

Tài liệu tham khảo:

1. Sắc ký lỏng hiệu năng cao. Wikipedia, Wikimedia Foundation, ngày 10 tháng 4 năm 2018, Có sẵn tại đây.
2. HPTLC. LinkedIn SlideShare, ngày 30 tháng 5 năm 2011, Có sẵn tại đây.

Hình ảnh lịch sự:

1. Tiếng vang HPTLCplatetoMS của Kjaergaard tại Wikipedia tiếng Anh - Chuyển từ en.wikipedia sang Commons (Tên miền công cộng) qua Commons Wikimedia
2. Hplcvvv của By Dr. Dr. rer. giáng sinh sự ổn định Giáo sư Gertrud MorlockAssociate (Privatdozentin) Đại học HohenheimInstern of Chemistry Chemistry - G. Morlock, C. Oellect, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) qua Commons Wikimedia