Sự khác biệt giữa HPLC và LCMS

Sự khác biệt chính - HPLC so với LCMS
 

Trước tiên chúng ta hãy xem xét ý nghĩa của HPLC và LCMS trước khi phân tích sự khác biệt giữa HPLC và LCMS. Sắc ký là một kỹ thuật tách trong phân tích hóa học trong đó các thành phần mẫu được tách ra trong quá trình đi qua môi trường sắc ký. Nó cũng liên quan đến sự tương tác với mẫu, pha tĩnh và pha động. HPLC là viết tắt của Sắc ký lỏng hiệu năng cao, và nó được sử dụng như một phương pháp sắc ký lỏng trong hóa học phân tích. Sự kết hợp của Sắc ký lỏng và Quang phổ khối (LCMS) đã được phát triển để phân tích định lượng các phân tử sinh học được chọn và nó một quy trình xét nghiệm đặc biệt nhạy cảm, chính xác và cụ thể so với HPLC. Đây là sự khác biệt chính giữa HPLC và LCMC. Bài viết này sẽ giới thiệu cho bạn về HPLC và LCMC liên quan đến phân tích hóa học và thảo luận về sự khác biệt giữa HPLC và LCMS.

HPLC là gì?

Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) là phổ biến kỹ thuật tách trong hóa học phân tích. Nó là chủ yếu Được sử dụng để tách các thành phần, để xác định và định lượng từng thành phần trong hỗn hợp. Trước đó, phương pháp này được gọi là sắc ký lỏng cao áp bởi vì nó phụ thuộc vào máy bơm để chảy một dung môi lỏng có áp suất bao gồm hỗn hợp mẫu qua cột được đóng gói bằng vật liệu hấp phụ rắn. Mỗi và mọi thành phần trong hỗn hợp mẫu tương tác khác nhau với vật liệu hấp phụ rắn, dẫn đến tốc độ dòng chảy khác nhau cho các thành phần khác nhau. Điều này có thể dẫn đến việc tách các thành phần khi chúng chảy ra cột HPLC.

HPLC đã được sử dụng cho nhiều các ứng dụng nhu la phân tích nồng độ vitamin D trong máu, sử dụng ma túy bất hợp pháp của vận động viên bằng cách phát hiện dư lượng thuốc trong nước tiểu của họ, phân loại các thành phần của mẫu sinh học phức tạp cho mục đích nghiên cứu và phân tích và sản xuất dược phẩm.

LCMS là gì?

Phương pháp sắc ký khối phổ sắc ký lỏng (LCMS) là một kỹ thuật phân tích kết hợp khả năng tách vật lý của sắc ký lỏng với khả năng phân tích khối lượng của phép đo phổ khối (MS). Sắc ký lỏng là một kỹ thuật tách và phép đo phổ khối được sử dụng để phân tích tỷ lệ khối lượng-điện tích của các hạt tích điện. Sự phân tách vật lý thường đạt được bằng HPLC và cách khác, LCMS còn được gọi là HPLC-MS. LCMS là một kỹ thuật phân tích vượt trội có một độ chính xác, độ nhạy và độ đặc hiệu rất cao so với HPLC. Vì vậy, nó rất hữu ích trong nhiều ứng dụng như mục đích nghiên cứu, phân tích thuốc, phân tích thực phẩm, vv LCMS là chủ yếu Được sử dụng để phân tách, phát hiện, xác định và định lượng các đặc tính sinh hóa của một mẫu cụ thể với sự có mặt của hỗn hợp hóa học phức tạp.

Sự khác biệt giữa HPLC và LCMC?

Từ viết tắt và định nghĩa của HPLC và LCMC

HPLC: HPLC là viết tắt của Sắc ký lỏng hiệu năng cao. Đây là một kỹ thuật tách chủ yếu được sử dụng để tách các thành phần, để xác định và định lượng từng thành phần trong hỗn hợp.

LCMS: LCMS là viết tắt củaSắc ký lỏng và phép đo phổ khối. Đây là một kỹ thuật phân tích kết hợp khả năng tách vật lý của sắc ký lỏng với khả năng phân tích khối lượng của phép đo phổ khối (MS).

Đặc điểm của HPLC và LCMC

Phân loại

HPLC: Đây chỉ là phương pháp sắc ký lỏng.

LCMS: Đây là sự kết hợp giữa phương pháp sắc ký lỏng và phương pháp khối phổ.

Hiệu quả

HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC kém hiệu quả và chậm hơn.

LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS hiệu quả và nhanh hơn.

Nhạy cảm

HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC ít nhạy hơn.

LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS nhạy hơn.

Tính đặc hiệu

HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC ít cụ thể hơn.

LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS cụ thể hơn.

Sự chính xác

HPLC: HPLC cho kết quả kém chính xác hơn LCMS để xác định một số hóa chất.

LCMS: LCMS cho kết quả chính xác hơn HPLC để xác định một số hóa chất.

Thành phần

HPLC: HPLC có thể được coi là một thành phần của LCMS.

LCMS: LCMS không thể được coi là một thành phần của HPLC.

Nguồn ion

HPLC: Nguồn ion không tồn tại trong thiết bị HPLC.

LCMS: Nguồn ion có trong thiết bị LCMS.

Các ứng dụng

HPLC: Các ion, polyme, phân tử hữu cơ và phân tử sinh học có thể được phân tích bằng HPLC.

LCMS: Phân tử hữu cơ và phân tử sinh học có thể được phân tích. Tương phản với HPLC, LCMS có thể được sử dụng để kiểm tra các hỗn hợp được phân giải không hoàn chỉnh.

Hoạt động

HPLC: Sơ đồ của một thiết bị HPLC được đưa ra trong hình 1, và nó thường bao gồm một bộ lấy mẫu tự động, máy bơm và máy dò. Bộ lấy mẫu đưa hỗn hợp mẫu vào pha động (hỗn hợp áp suất của các dung môi như nước, axetonitril và / hoặc metanol) chuyển nó vào cột. Các máy bơm cung cấp lưu lượng và thành phần mong muốn của pha động qua cột. Cột chứa đầy chất hấp phụ, là một hạt rắn có hạt như silica hoặc polyme. Máy dò tạo ra một tín hiệu tỷ lệ với lượng hiện diện của thành phần mẫu trong cột, do đó cho phép phân tích định lượng các thành phần mẫu được chọn. Thiết bị HPLC được điều khiển và phân tích dữ liệu được cung cấp bởi bộ vi xử lý kỹ thuật số và phần mềm người dùng.

Hình 1: Sơ đồ thiết bị HPLC

LCMS: Sơ đồ của thiết bị LCMS được đưa ra trong hình 2. Trích xuất mẫu được chèn vào cột bao gồm HPLC. Cột này giữ lại các chất chuyển hóa mẫu dựa trên các ký tự vật lý và các chất chuyển hóa khác nhau chảy vào máy quang phổ khối ở các khoảng thời gian khác nhau. Quang phổ khối được sử dụng để đánh giá khối lượng của các hạt, để xác định sự sắp xếp nguyên tố của một phân tử và để làm rõ các cấu trúc phân tử. Tuy nhiên, mẫu phải được ion hóa để tạo ra các phân tử tích điện để xác định tỷ lệ khối lượng tính theo khối lượng của chúng. Do đó, thay vì các công cụ HPLC, LCMS bao gồm ba mô-đun bổ sung như nguồn sắt, máy phân tích khối và máy dò. Một nguồn ion có thể biến mẫu pha khí thành các ion và máy phân tích khối lượng nhóm các ion theo khối lượng của chúng bằng trường điện từ. Cuối cùng, một máy dò định lượng các giá trị và cung cấp dữ liệu của từng ion có trong mẫu. Kỹ thuật LCMS có thể được sử dụng cho cả ứng dụng định tính và định lượng.

  Hình 2: Sơ đồ thiết bị LCMS

Tóm lại, HPLC là phương pháp sắc ký lỏng trong khi LCMS là sự kết hợp giữa sắc ký lỏng và phép đo phổ khối. Cả hai kỹ thuật phân tích này đều có các đặc điểm khác nhau, nhưng chúng có thể được sử dụng để xác định và định lượng thành phần thực phẩm, dược phẩm và các phân tử hoạt tính sinh học khác.

Tài liệu tham khảo Arpino, P. (1992). Kết hợp sắc ký lỏng khối phổ. Phần III. Các ứng dụng của thermospray. Nhận xét khối phổ, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. và Spoendlin, C. (2004). Các khía cạnh thực tế của sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo nhanh sử dụng cột đóng gói hạt 3μm và cột nguyên khối trong phát triển dược phẩm và sản xuất làm việc theo thực tiễn sản xuất tốt hiện nay. Tạp chí sắc ký, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. và Kerns, E. H. (1999). Ứng dụng LC / MS trong phát triển thuốc. Nhận xét khối phổ, 18 (3-4): 187-279. Murray, K.K (1997). Kết hợp giải hấp / ion hóa bằng ma trận với sự phân tách chất lỏng. Nhận xét khối phổ 16 (5): 283. Hình ảnh lịch sự: Hồi Hplc bởi người tải lên ban đầu là Kjaergaard tại en.wikipedia - Chuyển từ en.wikipedia. (Miền công cộng) thông qua Commons