Nuôi cấy mô là một phương pháp được sử dụng để tạo ra sự phát triển của các tế bào được tách ra khỏi sinh vật và được nuôi cấy trong các môi trường nuôi cấy khác nhau. Trong nuôi cấy mô, môi trường nuôi cấy đóng vai trò quan trọng. Các tế bào khác nhau phát triển trong môi trường nuôi cấy khác nhau tùy thuộc vào các đặc điểm sinh lý và hóa học của tế bào. Nuôi cấy đơn lớp và nuôi cấy huyền phù là hai loại nuôi cấy chính được sử dụng trong quá trình nuôi cấy mô. Một nền văn hóa đơn lớp là một neo đậu phụ thuộc nuôi cấy trong đó tế bào phát triển trong khi gắn với chất nền và nuôi cấy huyền phù là một neo đậu nuôi cấy độc lập nơi tập hợp tế bào được sử dụng để thiết lập nuôi cấy tế bào trong môi trường lỏng. Đây là sự khác biệt chính giữa văn hóa đơn lớp và văn hóa đình chỉ.
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Văn hóa đơn lớp là gì
3. Văn hóa đình chỉ là gì
4. Điểm tương đồng giữa văn hóa đơn lớp và đình chỉ
5. So sánh cạnh nhau - Văn hóa đơn lớp và đình chỉ ở dạng bảng
6. Tóm tắt
Nuôi cấy đơn lớp được định nghĩa là một kiểu nuôi cấy trong đó các tế bào được nuôi cấy trong một lớp duy nhất trên bình hoặc đĩa petri chứa môi trường nuôi cấy. Văn hóa đơn lớp cũng được gọi là văn hóa tuân thủ hoặc văn hóa phụ thuộc neo. Lý do đề cập đến văn hóa phụ thuộc vào neo hoặc neo là vì các tế bào này cần một chất nền để gắn vào trong quá trình tăng trưởng của chúng. Họ được tôn trọng vào nuôi cấy tế bào chứa chất nền.
Các chất nền được sử dụng trong môi trường nuôi cấy phải được tính phí trước khi sử dụng. Các chất nền tích điện thúc đẩy tế bào đến các tương tác tế bào. Chất thải ion điện, lớp phủ cation hóa trị hai và chiếu xạ gamma là những nguồn được sử dụng để sạc các chất nền này. Trong môi trường nuôi cấy đơn lớp, một khi các tế bào được tiêm, sự tăng trưởng được điều hòa với việc sử dụng quy trình gọi là ức chế tiếp xúc. Trong quá trình ức chế tiếp xúc, sự tăng trưởng của tế bào bị bắt giữ để ngăn chặn sự tăng sinh của các tế bào bình thường một khi chúng hình thành một lớp đơn lớp gắn trên bề mặt.
Hình 01: Văn hóa tuân thủ
Các tế bào phụ thuộc vào chất nền khác để đính kèm được gọi là các tế bào tuân thủ. Những tế bào kết dính này thường có nguồn gốc từ các mô cơ quan như thận, v.v ... Những tế bào này bất động và thường được gắn vào mô liên kết. Do đó, tất cả các yếu tố tăng trưởng thiết yếu này cần được cung cấp khi phát triển các tế bào này trên môi trường nuôi cấy. Tầm quan trọng của văn hóa đơn lớp là nó bắt chước các điều kiện tự nhiên ban đầu để tế bào thiết lập đúng.
Nuôi cấy huyền phù có thể được định nghĩa là một kiểu nuôi cấy trong đó sự nhân lên của các tập hợp nhỏ của các tế bào hoặc các tế bào đơn lẻ diễn ra lơ lửng trong một môi trường lỏng liên tục bị khuấy trộn. Nói cách khác, nuôi cấy huyền phù còn được gọi là nuôi cấy tế bào nuôi cấy tế bào. Văn hóa này hỗ trợ trong việc thiết lập các tế bào nuôi cấy đơn có thể được sử dụng trong quá trình điều tra các tế bào thực vật liên quan đến các tiềm năng và tính chất khác nhau của chúng. Điều tra về khía cạnh này có thể được sử dụng để hiểu mối tương quan giữa các tế bào và ảnh hưởng của chúng khi nói đến các sinh vật đa bào.
Trong quá trình phát triển thực vật ban đầu, một mô sẹo được hình thành là một khối các tế bào không phân biệt. Mức tăng trưởng này gây ra những trở ngại cho việc xác định các sự kiện tế bào trong giai đoạn tăng trưởng và phát triển của cây. Nuôi cấy huyền phù đã được giới thiệu để khắc phục tình trạng này vì nó cung cấp một môi trường nuôi cấy tuyệt vời để thiết lập nuôi cấy tế bào đơn từ các tập hợp tế bào nhỏ thu được từ mô sẹo. Điều này đã được sử dụng để nghiên cứu các khía cạnh hình thái và sinh hóa khác nhau trong giai đoạn đầu phát triển của cây.
Hình 02: Văn hóa đình chỉ
Trong bối cảnh thu được một tế bào nuôi cấy lý tưởng, phương pháp điển hình là chuyển một khối mô sẹo có thể hòa tan vào môi trường chất lỏng bị khuấy trộn, nơi khối lượng bị phá vỡ và phân tán dễ dàng. Sau đó, calli lớn được sàng lọc để giữ các khối tế bào nhỏ và đơn tế bào. Sau đó, các tế bào này được chuyển vào một phương tiện khác. Các tế bào đang phát triển tích cực thu được sau hai đến ba tuần.
Monolayer vs Đình chỉ văn hóa | |
Một nền văn hóa đơn lớp là một nền văn hóa phụ thuộc vào neo nơi các tế bào được phát triển trong khi gắn vào một chất nền. | Nuôi cấy huyền phù là nuôi cấy độc lập neo trong đó sự nhân lên của các tập hợp nhỏ của các tế bào hoặc các tế bào đơn diễn ra lơ lửng trong môi trường lỏng bị khuấy trộn. |
Yêu cầu | |
Nuôi cấy đơn lớp đòi hỏi một tàu nuôi cấy mô được xử lý theo chu kỳ. | Nuôi cấy huyền phù có thể đạt được bằng các tàu được xử lý nuôi cấy không mô. |
Hạn chế tăng trưởng | |
Sự phát triển của văn hóa đơn lớp sẽ bị giới hạn bởi diện tích bề mặt ảnh hưởng trực tiếp đến năng suất. | Giới hạn tăng trưởng của nuôi cấy huyền phù diễn ra bởi nồng độ của các tế bào trong môi trường. |
Phân ly tế bào | |
Sự phân ly tế bào diễn ra một cách cơ học hoặc enzyme trong nuôi cấy đơn lớp. | Nuôi cấy huyền phù không cần sự hỗ trợ của enzyme và phương tiện cơ học để phân ly tế bào. |
Hình dung tế bào | |
Văn hóa đơn lớp cho phép dễ dàng hình dung các tế bào. | Thật khó để xem các tế bào trong môi trường nuôi cấy huyền phù. |
Chức năng | |
Văn hóa đơn lớp được sử dụng trong các lĩnh vực tế bào học, nghiên cứu và thu hoạch sản phẩm liên tục. | Nuôi cấy huyền phù được sử dụng để sản xuất hàng loạt protein, nghiên cứu và thu hoạch hàng loạt. |
Nuôi cấy đơn lớp và nuôi cấy huyền phù là hai nền văn hóa chính được sử dụng trong nuôi cấy mô. Văn hóa đơn lớp là một nền văn hóa phụ thuộc vào neo đậu. Các tế bào được phát triển trong nền văn hóa này, nơi chúng được gắn vào một chất nền có trong nền văn hóa. Các chất nền được tích điện trước khi sử dụng với sự tham gia của các nguồn khác nhau như lớp phủ hóa trị hai và chất thải ion. Nuôi cấy huyền phù là các nền văn hóa độc lập neo nơi các tế bào phát triển mà không cần sự trợ giúp của chất nền để gắn vào. Văn hóa này hỗ trợ trong việc thiết lập các tế bào nuôi cấy đơn có thể được sử dụng trong quá trình điều tra các tế bào thực vật liên quan đến các tiềm năng và tính chất khác nhau của chúng. Đây là sự khác biệt giữa văn hóa đơn lớp và văn hóa đình chỉ.
1. Văn hóa đình chỉ tế bào: Định nghĩa, nguyên tắc, giao thức và tầm quan trọng | Mô thực vật. Thảo luận Sinh học, ngày 26 tháng 10 năm 2015. Có sẵn tại đây
2. Văn hóa tế bào tuân thủ và đình chỉ. Học.com, Học.com. Có sẵn ở đây
1.'Cêu văn hóa trên PNIPAM'By Guillaume Paumier (người dùng: guillom) - Công việc riêng, (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia
2.'Sphagnum palustre trong Bioreactor'By ReskiLab, (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia