Làm mờ là một kỹ thuật quan trọng để phát hiện các chuỗi cụ thể của DNA, RNA và protein từ hỗn hợp của chúng trong sinh học phân tử. Nó được thực hiện bằng cách sử dụng một màng gọi là blot. Có các kỹ thuật làm mờ khác nhau như làm mờ phía bắc, phía nam và phía tây. Chọn một màng thích hợp cho quá trình làm mờ nên được thực hiện cẩn thận để ngăn chặn sự ràng buộc không đặc hiệu và phát hiện sai. Nitrocellulose, nylon và PVDF là những màng thường được sử dụng trong kỹ thuật làm mờ. Họ có những đặc điểm khác nhau. Sự khác biệt chính giữa màng nitrocellulose và màng nylon là Màng nitrocellulose có tiềm năng cố định protein cao trong khi màng nylon có khả năng cố định axit nucleic cao. Tuy nhiên, cả hai loại màng thường được sử dụng trong kỹ thuật làm mờ.
NỘI DUNG
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Màng Nitrocellulose là gì
3. Màng ni lông là gì
4. So sánh cạnh nhau -Nitrocellulose vs Màng nylon
5. Tóm tắt
Màng nitrocellulose là một bộ lọc màng thường được sử dụng trong các kỹ thuật làm mờ axit nucleic và protein. Nó có tiềm năng liên kết protein cao. Do đó, màng nitrocellulose được sử dụng rộng rãi trong kỹ thuật làm mờ phương Tây. Màng nitrocellulose tương thích với tất cả các kỹ thuật lai và cho thấy khả năng liên kết vượt trội mà không bị can thiệp. Màng nitrocellulose tự nhiên ưa nước. Chúng tạo ra tương tác ưa nước với các phân tử và cố định chúng một cách hiệu quả lên màng. Màng nitrocellulose thương mại có sẵn trong hai kích cỡ lỗ: 0,45 và 0,2.
Hình 01: Màng nitrocellulose được sử dụng trong phương Tây
Màng nylon là một loại màng thương mại khác được sử dụng trong kỹ thuật làm mờ. Nó được sử dụng thay thế với màng nitrocellulose cho vết rộp phía nam và phía bắc. Màng nylon là lý tưởng cho vết rộp phía Nam hơn nitrocellulose do có ái lực cao với liên kết với DNA. Do một số tính năng độc đáo của màng nylon, các nhà nghiên cứu thường sử dụng màng nylon cho vết rộp phía nam và phía bắc thay vì trên màng nitrocellulose. Màng nylon cũng được khuyên dùng để tước và đẩy lại, không giống như nitrocellulose.
Hình 02: Màng nylon được sử dụng để làm mờ vết rạn phía Nam
Nitrocellulose vs Màng nylon | |
Màng nitrocellulose giòn. | Màng nylon ít giòn. |
Sự điều khiển | |
Họ rất khó xử lý. | Họ rất dễ xử lý. |
Đẩy lùi | |
Màng nitrocellulose không được hỗ trợ rất khó để thay thế. | Reprobing dễ dàng với màng nylon. |
Khả năng tương thích với các điều kiện lưu trữ khác nhau | |
Màng nitrocellulose có ít sức mạnh hơn để chịu được các điều kiện bảo quản khác nhau. | Màng nylon phản ứng mạnh mẽ hơn với các điều kiện lưu trữ khác nhau. |
Sử dụng | |
Yêu cầu trước. | Không cần làm ướt trước cho màng nylon. |
Thiên nhiên | |
Màng nitrocellulose có bản chất ưa nước nhưng ít ưa nước hơn màng nylon. | Chúng có tính ưa nước cao trong tự nhiên. |
Tiềm năng bất động sản | |
Màng nitrocellulose có ái lực ít hơn với axit nucleic. Nhưng nó có ái lực cao với protein. | Màng nylon có khả năng liên kết cao với axit nucleic hơn màng nitrocellulose. |
Nitrocellulose và màng nylon là những tấm đặc biệt được sử dụng trong kỹ thuật làm mờ để tái tạo mô hình dải trên gel. Chúng cho phép khả năng phát hiện một chuỗi cụ thể hoặc protein từ hỗn hợp bằng cách cố định chúng trên màng. Một khi các phân tử cố định trên màng, nó có thể được sử dụng làm chất nền để phân tích lai với các đầu dò có nhãn. Màng nitrocellulose thường được sử dụng để phát hiện protein trong kỹ thuật làm mờ phương Tây do ái lực gắn kết cao với protein. Màng nylon thường được sử dụng để làm mờ vết rạn phía nam và phía bắc. Đây là sự khác biệt giữa màng nitrocellulose và màng nylon.
Người giới thiệu:
1. Hayes, P. C., C. R. Wolf và J. D. Hayes. Các kỹ thuật làm mờ vết rạn cho nghiên cứu về DNA, RNA và protein. BMJ: Tạp chí Y học Anh. Thư viện Y khoa Quốc gia Hoa Kỳ, 14 tháng 10 năm 1989. Web. Ngày 07 tháng 4 năm 2017
2. Mahmood, Tahrin và Ping-Chang Yang. Tiết Tây Blot: Kỹ thuật, Lý thuyết và Chụp rắc rối. Tạp chí khoa học y tế Bắc Mỹ. Medledge Publications & Media Pvt Ltd, tháng 9 năm 2012. Web. Ngày 07 tháng 4 năm 2017
Hình ảnh lịch sự:
1. Chuyển nhượng phương Tây blot Chuyển qua By Bensaccount tại Wikipedia tiếng Anh (CC BY 3.0) qua Commons Wikimedia