Sự khác biệt giữa Nitrocellulose và PVDF
Share
Sự khác biệt chính - Nitrocellulose so với PVDF
Western blot là một phương pháp cho phép phát hiện và định lượng các protein cụ thể từ một mẫu protein. Độ tin cậy của kỹ thuật phụ thuộc vào việc lựa chọn một màng chính xác để hấp thụ protein từ gel. Có nhiều loại màng vi mô khác nhau. Màng nitrocellulose và PVDF là hai loại màng như vậy được các nhà nghiên cứu ưa thích do các thuộc tính đặc biệt của chúng so với các loại màng khác. Việc lựa chọn giữa nitrocellulose hoặc PVDF cũng là một thách thức khác trong phương pháp làm mờ phương Tây. Cả nitrocellulose và PVDF đều có khả năng hấp thụ protein cao. Sự khác biệt chính giữa màng nitrocellulose và PVDF là Màng nitrocellulose không có khả năng loại bỏ kháng thể và tái sử dụng màng để tái kháng thể trong khi màng PVDF có khả năng tước và tái sử dụng.
NỘI DUNG
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Nitrocellulose là gì
3. PVDF là gì
4. So sánh cạnh nhau - Nitrocellulose vs PVDF
5. Tóm tắt
Nitrocellulose là gì?
Nitrocellulose là một polymer được sản xuất bằng cách xử lý cellulose bằng axit nitric và được sử dụng để tạo màng vi mô trong sinh học phân tử, đặc biệt là cho các kỹ thuật làm mờ như vết rộp phía nam, phía bắc và phía tây. Kích thước lỗ rỗng của màng nitrocellulose dao động từ 3 đến 20. Màng vi khuẩn nitrocellulose tạo điều kiện thuận lợi cho việc phát hiện phản ứng miễn dịch xảy ra trên bề mặt màng. Do đó, màng nitrocellulose thường được sử dụng để cố định protein và phát hiện các protein cụ thể trong phương Tây. Màng nitrocellulose cũng có thể cố định glycoprotein và axit nucleic.
Màng nitrocellulose được ưa thích trong các xét nghiệm dòng chảy bên do một số tính năng. Màng nitrocellulose hấp thụ protein ở nồng độ cao. Các dung môi được sử dụng để làm ướt màng không làm giảm sự hấp thụ protein màng nitrocellulose. Màng nitrocellulose có thể dễ dàng cắt theo kích thước gel mong muốn và chuyển protein từ gel sang màng bằng cách chuyển điện hoặc mao quản. Nitrocellulose cho phép dòng protein chảy qua màng nhanh hơn với khả năng liên kết cao. Nitrocellulose cho thấy một sức mạnh xử lý được cải thiện. Một thuộc tính đặc biệt khác của màng nitrocellulose là nó có thể dễ dàng dán bằng chất kết dính chống nước không dung môi lên các lớp nhựa khác nhau.
Hình 01: Màng nitrocellulose cho vết rộp phía tây
PVDF là gì?
Polyvinylidene Difluoride (PVDF) là fluoropolyme được sản xuất bằng cách trùng hợp vinylidene Difluoride và có khả năng cố định protein cao. Do đó, màng vi mô làm từ PVDF được sử dụng trong các kỹ thuật làm mờ phương Tây để phân tích các protein cụ thể từ hỗn hợp protein. Màng PVDF cũng có thể được sử dụng để phân tích axit amin và giải trình tự protein. Đặc tính quan trọng nhất của màng PVDF so với màng nitrocellulose là nó có thể dễ dàng loại bỏ các kháng thể và tái sử dụng cho các đầu dò kháng thể tiếp theo.
Màng PVDF dày hơn màng nitrocellulose; do đó, khả năng chống lại thiệt hại trong quá trình tái sử dụng nhiều hơn. Màng PVDF có tính kỵ nước cao. Do đó, chúng phải được ngâm trong metanol hoặc isopropanol trước khi sử dụng.
Sự khác biệt giữa Nitrocellulose và PVDF là gì?
Nitrocellulose vs PVDF | |
| Nitrocellulose là một polymer bao gồm cellulose. | PVDF là một fluoropolyme được sản xuất bởi sự trùng hợp của vinylidene Difluoride. |
| Kích thước lỗ màng | |
| Kích thước lỗ thông thường là 0,1, 0,2 hoặc 0,45μ | Kích thước lỗ thông thường là 0,1, 0,2 hoặc 0,45μm |
| Khả năng kết dính protein | |
| Nitrocellulose có khả năng liên kết protein từ 80 đến 100 g / cm2. | PVDF có khả năng liên kết protein từ 170 đến 200 g / cm2. |
| Nhạy cảm | |
| Điều này có độ nhạy thấp so với PVDF. | Điều này có độ nhạy cao. |
| Phát hiện các protein biểu hiện thấp | |
| Do độ nhạy của màng nitrocellulose thấp, nên nó không phù hợp để phát hiện các protein có biểu hiện thấp. | Điều này phù hợp hơn cho việc phát hiện các protein được biểu thị thấp do độ nhạy cao của nó. |
| Tiếng ồn nền | |
| Điều này có tiếng ồn nền thấp hơn | Điều này có tiếng ồn nền cao hơn. |
| Tương tác với Protein | |
| Các phân tử protein liên kết với màng nitrocellulose thông qua các tương tác kỵ nước. | Protein liên kết với màng PVDF thông qua tương tác kỵ nước và lưỡng cực. |
| Bản chất của màng | |
| Nitrocellulose giòn và dễ vỡ. Tuy nhiên, phiên bản của nitrocellulose có sẵn và chúng có khả năng kháng. | PVDF bền hơn và có khả năng kháng hóa chất cao hơn. |
| Khả năng dải và tái sử dụng | |
| Nitrocellulose có thể gặp khó khăn trong việc tước và đẩy lùi mà không làm mất tín hiệu. | PVDF là lý tưởng cho việc đẩy lùi và sắp xếp các ứng dụng. |
| Sự phù hợp | |
| Nitrocellulose là lý tưởng để phát hiện protein trọng lượng phân tử thấp. | PVDF phù hợp hơn để phát hiện các protein có trọng lượng phân tử cao hơn. |
| Công dụng khác | |
| Nitrocellulose có thể được sử dụng để phân tích axit nucleic và làm mờ vết đốm / khe. | PVDF có thể được sử dụng để giải trình tự protein và hệ thống xét nghiệm pha rắn. |
| Giá cả | |
| Cái này rẻ hơn màng PVDF. | Cái này đắt hơn màng nitrocellulose. |
| Cần làm ướt trước | |
| Màng nitrocellulose không cần dùng trước metanol | Màng PVDF yêu cầu làm sẵn bằng metanol. |
Tóm tắt - Nitrocellulose vs PVDF
Màng nitrocellulose là màng đầu tiên được sử dụng thương mại để xét nghiệm dòng chảy bên. Chúng có khả năng hấp thụ protein cao. Do đó, màng nitrocellulose được sử dụng trong phương Tây. PVDF là một loại màng khác được sử dụng trong phương Tây và nó cũng có khả năng hấp thụ protein cao. Cả hai loại được sử dụng trong phương Tây để phân tích protein. Tuy nhiên, màng PVDF có nhiều thuộc tính đặc biệt hơn, khiến chúng phù hợp hơn màng nitrocellulose để làm mờ vết rạn da phương Tây. Nhưng, màng nitrocellulose phù hợp hơn để phát hiện các protein có trọng lượng phân tử thấp, màng PVDF phù hợp hơn để phát hiện các protein có trọng lượng phân tử cao. Đây là sự khác biệt giữa màng nitrocellulose và PVDF.
Hình ảnh lịch sự:
1. Chuyển đổi phương Tây blot Chuyển qua By Bensaccount tại Wikipedia tiếng Anh (CC BY 3.0) qua Commons Wikimedia
Tài liệu tham khảo:
1.Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun và Thomas A. Neubert. Sử dụng màng Nitrocellulose cho đặc tính protein bằng phương pháp giải hấp / ion hóa khối lượng bằng tia laser. Hóa phân tích. Thư viện Y khoa Quốc gia Hoa Kỳ, 15 tháng 7 năm 2006. Web. 28 tháng 3 năm 2017
2. Công cụ đánh dấu phân tử và công nghệ sinh học thực vật. Sách Google. N.p., n.d. Web. 28 tháng 3 năm 2017
3. Thứ hai, ngày 8 tháng 4 năm 2013 Tweet. 195 The Magic's In the Membrane: Chọn một cách khôn ngoan cho kết quả Western Blot tốt nhất. Biocompare. N.p., ngày 08 tháng 4 năm 2013. Web. 28 tháng 3 năm 2017
