Sự khác biệt giữa RNASE A và RNASE H

Sự khác biệt chính - RNASE A vs RNASE H
 

Các ribonuclease là các nuclease đặc biệt làm suy giảm RNA thành các đơn vị nhỏ hơn. Chúng có thể được chia thành hai loại; endoribonuclease và exoribonuclease. Endoribonuclease là một endonuclease có thể làm suy giảm RNA chuỗi đơn hoặc chuỗi kép. Nó cắt các liên kết phosphodiester trong chuỗi polynucleotide RNA. Các ví dụ là RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P và RNase H. Exoribonuclease là một exonuclease làm suy giảm RNA bằng cách loại bỏ các nucleotide cuối từ 5'end hoặc 3'end của phân tử RNA. Các ví dụ là RNase R, RNase II, RNase D và RNase PH. Các sự khác biệt chính giữa RNASE A và RNASE H là RNase A là một ribonuclease tụy đặc biệt phân giải RNA chuỗi đơn thành các thành phần nhỏ hơn trong khi RNase H là một enzyme không đặc hiệu giúp tách RNA trong RNA-DNA thành các đơn vị nhỏ hơn thông qua cơ chế thủy phân.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. RNASE A là gì
3. RNASE H là gì
4. Điểm tương đồng giữa RNASE A và RNASE H
5. So sánh cạnh nhau - RNASE A vs RNASE H ở dạng bảng
6. Tóm tắt

RNASE A là gì?

RNase A là một ribonuclease tụy, đặc biệt tách các cytosine và uracil chưa được ghép đôi ở 3 'đầu RNA đơn chuỗi. RNase H hoạt động ở nồng độ muối cao hơn (nồng độ NaCl 0,3M hoặc cao hơn). Phản ứng thủy phân là hai bước. Nó tạo thành một sản phẩm phosphoryl hóa 3 'thông qua trung gian monophosphate 2', 3 '. Mặc dù nó đặc hiệu với RNA chuỗi đơn ở nồng độ muối cao hơn, nhưng nó cũng có thể làm suy giảm RNA và RNA chuỗi kép trong RNA-DNA lai ở nồng độ NaCl thấp hơn (thấp hơn 0,3M NaCl).

Bruce Merrifield lần đầu tiên tổng hợp enzyme này. RNase A là một enzyme rất phổ biến trong nghiên cứu phân tử. RNase tụy bò là một ví dụ về RNase A. Và nó là một trong những enzyme cứng nhất được sử dụng trong phòng thí nghiệm. Enzyme này không cần một đồng yếu tố cho hoạt động của nó. Nó là một enzyme chịu nhiệt cao. RNase A là enzyme đầu tiên và là protein thứ ba được phát hiện trình tự axit amin chính xác. Enzim này rất nhỏ với 124 axit amin và khối lượng phân tử 12600da. Và nó có bốn dư lượng Histidine (12 và His 119 liên quan đến phản ứng xúc tác).

Hình 01: RNase A

RNase A có thể được phân lập bằng cách đun sôi một mẫu thô. Khi sôi, tất cả các enzyme khác làm suy giảm RNase A. RNase A còn lại là một enzyme ổn định đáng kinh ngạc. Enzyme này ức chế với protein ức chế ribonuclease, phức hợp kim loại nặng và uridine vanadate.

RNase H là gì?

RNase H là một enzyme ribonuclease không đặc hiệu có thể làm suy giảm RNA trong lai RNA-DNA thông qua phản ứng thủy phân. RNase H cắt liên kết 3'- liên kết O-P của RNA trong một lai RNA-DNA. Cuối cùng, nó tạo ra các sản phẩm kết thúc 3'OH và 5 'phosphate. Trong sao chép DNA, nó đóng một vai trò quan trọng bằng cách loại bỏ đoạn mồi RNA sau khi các chuỗi DNA mới được hình thành. Trong điều kiện phòng thí nghiệm, nó đặc biệt làm suy giảm RNA trong lai RNA-DNA nhưng không phải DNA và RNA không điều hòa. Và enzyme này thường được sử dụng để phá hủy mẫu RNA sau khi chuỗi DNA bổ sung đầu tiên được hình thành trong quá trình tổng hợp cDNA.

Hình 02: RNase H

RNase H cũng sử dụng trong các thử nghiệm bảo vệ nuclease. Nó cũng có thể được kết hợp để loại bỏ đuôi poly A khỏi mRNA. RNase H có khả năng phá hủy RNA không mã hóa bên trong và bên ngoài tế bào. Các ion kim loại được yêu cầu làm đồng yếu tố cho hoạt động protein này. Một chelator (EDTA) có thể được sử dụng để ức chế enzyme RNase H.

Điểm giống nhau giữa RNASE A và RNASE H?

• Cả hai đều là protein trong tự nhiên.
• Cả hai đều là endoribonuclease
• Cả hai đều có thể làm suy giảm RNA.
• Cả hai thực hiện phản ứng thủy phân.
• Phòng thí nghiệm phân tử sử dụng cả hai.

Sự khác biệt giữa RNASE A và RNASE H?

RNASE A vs RNASE H
RNase A là một ribonuclease tụy, đặc biệt cắt bỏ 3 'phần còn lại của cytosine và uracil của ARN sợi đơn ở nồng độ muối cao hơn.	RNase H là một enzyme ribonuclease không đặc hiệu có thể làm suy giảm RNA trong RNA-DNA lai thông qua phản ứng thủy phân.
Bản chất của sự phân tách RNA
RNase A đặc biệt tách RNA chuỗi đơn ở nồng độ muối cao hơn.	RNase H tách RNA trong RNA-DNA lai.
Cần các yếu tố đồng hoạt động
RNase A không cần đồng yếu tố cho hoạt động của nó.	RNase H cần các ion kim loại làm đồng yếu tố cho hoạt động của nó.
Các chất ức chế hoạt động của protein
Ribonuclease ức chế protein, kim loại nặng và phức hợp vanadate uridine ức chế hoạt động RNAse A.	Một chelator (EDTA) ức chế hoạt động RNase H.
Loại bỏ RNA mồi trong sao chép DNA
RNase A không được sử dụng để loại bỏ đoạn mồi RNA trong sao chép DNA.	RNase H được sử dụng để loại bỏ RNA mồi trong sao chép DNA
Loại bỏ mẫu DNA trong tổng hợp DNA bổ sung (C-DNA)
RNase A không được sử dụng để loại bỏ mẫu RNA trong quá trình tổng hợp DNA bổ sung (C-DNA).	RNase H được sử dụng để loại bỏ mẫu RNA trong quá trình tổng hợp DNA bổ sung (C-DNA).
Loại bỏ Poly-A-Tail trong mRNA được lai hóa thành Oligo (dt)
RNase A không được sử dụng để loại bỏ đuôi đuôi poly-A trong mRNA được lai với oligo (dt).	RNase H được sử dụng để loại bỏ đuôi đuôi poly-A trong mRNA được lai với oligo (dt)

Tóm lược - RNASE A vs RNASE H

Các ribonuclease là các enzyme nuclease có khả năng phân tách RNA thành các đơn vị nhỏ hơn. Chúng có hai loại; endoribonuclease và exoribonuclease. Endoribonuclease là một endonuclease có khả năng làm suy giảm RNA chuỗi đơn hoặc chuỗi kép. Và nó cắt liên kết phosphodiester trong chuỗi polynucleotide RNA. RNase A và RNase H là hai endoribonuclease. RNase A là một ribonuclease tụy đặc biệt phân tách dư lượng cytosine và uracil chưa ghép ở 3 'đầu RNA đơn chuỗi ở nồng độ muối cao hơn. RNase H là một enzyme ribonuclease không đặc hiệu có thể làm suy giảm RNA trong lai RNA-DNA thông qua phản ứng thủy phân. Đây là sự khác biệt giữa RNase A và RNase H.

Tải xuống bản PDF RNASE A vs RNASE H

Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa RNASE A và RNASE H

Tài liệu tham khảo:

1.Karuturi, Tác giả Amrutha. Cần 17 để biết sự thật về RNase A. Blog AG, ngày 22 tháng 2 năm 2017. Có sẵn tại đây
2. Ribonuclease. Wikipedia, Wikimedia Foundation, ngày 5 tháng 1 năm 2018. Có sẵn tại đây  

Hình ảnh lịch sự:

1.'Rase A'By Không có tác giả nào có thể đọc được bằng máy. Vossman giả định (dựa trên khiếu nại bản quyền)., (CC BY-SA 2.5) qua Commons Wikimedia
2.'RNase H fix'By Không có tác giả nào có thể đọc được bằng máy. Vossman giả định (dựa trên khiếu nại bản quyền)., (CC BY-SA 2.5) qua Commons Wikimedia