Sự khác biệt giữa Trang SDS và Western Blot

Sự khác biệt chính - Trang SDS so với Western Blot
 

Western blot là một kỹ thuật phát hiện một loại protein cụ thể từ một mẫu protein. Kỹ thuật này được thực hiện thông qua một số bước chính: điện di gel, làm mờ và lai. Điện di gel natri dodecyl sulfate polyacrylamide (Trang SDS) là một loại kỹ thuật điện di gel được sử dụng để tách protein theo kích thước của chúng (trọng lượng phân tử). Western blot là một tấm đặc biệt của màng thấm được sử dụng để chuyển cùng một kiểu protein trong Trang SDS. Sự khác biệt chính giữa Trang SDS và Western blot là Trang SDS cho phép tách protein trong hỗn hợp trong khi Western blot cho phép phát hiện và định lượng một loại protein cụ thể từ hỗn hợp. Cả hai đều hữu ích trong nghiên cứu phân tích protein.

NỘI DUNG
1. Tổng quan và sự khác biệt chính
2. Trang SDS là gì
3. Western Blot là gì
4. So sánh cạnh nhau - Trang SDS vs Western Blot
5. Tóm tắt

Trang SDS là gì?

Trang SDS là một kỹ thuật điện di gel được sử dụng để tách protein. Nó thường được sử dụng trong hóa sinh, di truyền, pháp y và sinh học phân tử. Khi các protein được chiết xuất từ ​​mẫu, chúng được chạy trên một loại gel được tạo thành từ SDS và polyacrylamide. SDS là một chất tẩy anion được sử dụng để tuyến tính hóa protein (protein biến tính) và truyền điện tích âm cho protein tuyến tính tỷ lệ thuận với khối lượng phân tử của chúng. Polyacrylamide trở thành hỗ trợ vững chắc cho gel. Các protein bị biến tính được tích điện âm di chuyển về phía cực dương của thiết bị thông qua gel. Theo kích thước của protein, tốc độ di chuyển khác nhau giữa các protein và xảy ra sự phân tách. Do đó, trang SDS rất hữu ích cho việc tách các protein riêng lẻ dựa trên kích thước của chúng.

Việc chuẩn bị gel polyacrylamide để phân đoạn protein là một bước quan trọng trong Trang SDS. Nồng độ chính xác của polyacrylamide và loại tác nhân liên kết ngang được sử dụng ảnh hưởng mạnh đến các tính chất vật lý của gel, tạo ra sự phân tách thực tế của các protein khác nhau. Các kích thước lỗ của gel nên được quản lý đúng cách để phân tách hiệu quả. Tuy nhiên, Trang SDS được coi là một kỹ thuật tách protein có độ phân giải cao.

Kỹ thuật SDS Page có một hạn chế lớn trong phân tích protein. Do SDS làm biến tính protein trước khi tách, nó không cho phép phát hiện hoạt động của enzyme, tương tác liên kết với protein, đồng yếu tố protein, v.v..

Hình 01: Trang SDS

Tây phương là gì?

Kỹ thuật làm mờ phương Tây cho phép phát hiện một loại protein cụ thể từ hỗn hợp protein và đo lường số lượng và trọng lượng phân tử của protein. Western blot là màng được sử dụng trong quy trình làm mờ để có được hình ảnh phản chiếu của các mẫu protein trong gel SDS- polyacrylamide. Màng được sử dụng để làm mờ vết rạn da phương Tây hầu hết được tạo thành từ nitrocellulose hoặc polyvinylidene Difluoride (PVDF). Màng có protein được chuyển có thể được sử dụng để xác định protein mong muốn. Nó đòi hỏi kháng thể chất lượng cao để phát hiện protein mong muốn bằng cách lai. Kháng thể liên kết với kháng nguyên cụ thể của nó và cho thấy sự hiện diện của kháng nguyên mong muốn là protein.

Việc chuyển các protein từ gel polyacrylamide SDS sang blot phía tây được thực hiện bằng phương pháp đốt điện. Đây là một phương pháp hiệu quả và nhanh chóng, làm cho các protein điện di ra khỏi gel và truyền vào màng nitrocellulose (Western blot).

Hình 02: Western Blot

Sự khác biệt giữa Trang SDS và Western Blot là gì?

Trang SDS vs Western Blot
Trang SDS là một kỹ thuật điện di gel.	Western blot là một kỹ thuật được thực hiện trên màng để phát hiện một loại protein cụ thể từ hỗn hợp.
Sử dụng
Trang SDS cho phép tách protein theo kích thước của chúng.	Western blot cho phép chuyển protein trên gel trang SDS mà không thay đổi kiểu mẫu của nó & cho phép lai với các kháng thể cụ thể.
Nhược điểm
Biến tính protein, chi phí cao và sự hiện diện của hóa chất độc tố thần kinh là những nhược điểm của kỹ thuật này.	Kỹ thuật này tốn nhiều thời gian và đòi hỏi một điều kiện cá nhân và kiểm soát cụ thể có kinh nghiệm.

Tóm tắt - Trang SDS vs Western Blot

Trang SDS và Western blot là hai phương pháp liên quan đến phân tích protein. Trang SDS cho phép dễ dàng tách protein trên gel theo trọng lượng phân tử của chúng. Western blot giúp xác nhận sự hiện diện và số lượng của một loại protein cụ thể thông qua quá trình lai với các kháng thể cụ thể. Đây là sự khác biệt giữa Trang SDS và Western blot.

Người giới thiệu:
1. Blancher, C. và A. Jones. Thanh SDS -PAGE và Kỹ thuật làm mờ phương Tây. Các phương pháp trong y học phân tử. Thư viện Y khoa Quốc gia Hoa Kỳ, n.d. Web. 27 tháng 3 năm 2017
2. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig và David H. Petering. Cấm bản địa SDS-TRANG: Phân tách protein điện phân độ phân giải cao với việc giữ lại các thuộc tính bản địa bao gồm các ion kim loại ràng buộc. Metalomics: tích hợp khoa học sinh trắc học. Thư viện Y khoa Quốc gia Hoa Kỳ, tháng 5 năm 2014. Web. 27 tháng 3 năm 2017.

Hình ảnh lịch sự:
1. Điện di SDS-PAGE Điện di 'Bensaccount tại Wikipedia tiếng Anh (CC BY 3.0) qua Commons Wikimedia
2. miền Tây blot 114A Xuất bởi Amanthabagdon - Công việc riêng (Miền công cộng) qua Commons Wikimedia